2,3,5-三苯基氯化四氮唑浓度对细菌菌落总数测定的影响.pdfVIP

江苏预防医学 2016 年 7 月第 27 卷第 4 期 Jiangsu J Prev M时，July ， 2016 ， Vol. 27 ,No. 4 • 507 • ·卫生检验与实验研究· 2 ， 3 ， 5-三苯基氯化四氮pt浓度对细菌菌落总数测定的影响 张军成 江苏省涟水县疾病预防控制中心，淮安 223400 摘要:目的 了解 2 ， 3 ， 5-三苯基氯化四氮哇CTTC)浓度对细菌菌落总数测定的影响，以规范该法在食品细菌菌落总数测 定中的应用。方法 采用细菌定量培养的方法，观察含不同浓度 TTC 营养琼脂培养基对不同细菌生长形成菌落数的影响e 将不同稀释度的大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽胞杆菌纯培养物各 1 mL，分别依次接种到~ TTC 质量浓度分别为 0.02 、 O. 町、0.10 g/L 的平板计数琼脂中，同时设空白对照和盐水试剂对照，观察菌落生长状况。结果 大肠埃希菌在不同 TTC 浓 度培养基中均能正常生长，其形成菌落数不受影响。培养基中含 TTC 质量浓度)!0.05 g/L 对金黄色葡萄球菌菌落数形成有 明显影响，注0.02 g/L 对蜡样芽胞杆菌的菌落数形成有明显影响。结论 培养基中含 TTC 浓度~0.10 g/L 对大肠埃希离生 长基本元影响，0.02 g/L 对金黄色葡萄球菌和蜡样芽胞杆菌生长均会产生影响。 关键词:2 ， 3 ， 5-三苯基氯化四氮嗖(TTC) ;细离数测定z 培养基s 使用浓度 文章编号: 1006-9070(2016)04-0507一02 中图分类号:R1l 7 文献标识码:B 2 ， 3 ， 5 氯化三苯四氮瞠(TTC) 在 GB/T 4789.27 nX 108 cfu/mL的菌悬液。蜡样芽胞杆菌则挑取典型 -2008((食品微生物学检验鲜乳中抗生素残留检验》 菌落接种到装有 5 mL 脑浸液肉汤试管中.37C 培养 和 2007 版《化装品卫生规范》中均为推荐试剂，可用 24 h. 经适当稀释后制备成符合含菌量要求的菌悬液 于食品和化妆品中抗菌药物和细菌检测。 TTC 在细 备用。 菌检测中应用主要是利用其能使菌落显色而便于菌 1. 2. 2 TTC 培养基制备:参照国标 GB4789. 2-2010[2J • 落计数，以区分样品中颗粒与菌落。实际应用中， 将营养琼脂培养基加热融化，待冷却至约45C.分别加入 TTC 添加浓度不当可能会影响细菌生长，从而影响细 TTC，制成不同质量浓度 0.02、 0.05 、 0.10 g/L。 菌计数的准确性。鉴于相关规范和标准中均未规定 1. 2. 3 接种细菌培养z 分别取上述菌悬液 1 mL 置于 TTC 具体使用浓度，本研究在培养基中加入不同被度 无菌平皿内，每种细菌每个浓度重复 2 次，迅速倒入 的 TTC，观察其对革兰阴性杆菌、革兰阳性球菌和芽 上述含不同浓度 TTC 的培养基约 15 mL 立即混匀; 胞菌生长的影响，以选择出最佳使用浓度和可能的禁 同时接种无菌生理盐水作为空白对照。待琼脂凝固 忌。现将观察结果报告如下。 后翻转平板，置 37C 孵箱培养 24 h. 观察结果并计数 平板上菌落数。 1 材料与方法 1. 1 材料 TTC(上海华蓝科技有限公司).普通营