梅花鹿茸多肽的化学结构及生物活性 - chemical journal of chinese .pdfVIP

Vol.33 高等 学校 化 学 学报 No.9 2012年9月 摇 摇 摇 摇 摇 摇 CHEMICALJOURNAL OF CHINESE UNIVERSITIES摇 摇 摇 摇 摇 摇 2000 ~2004 梅梅花鹿茸多肽的化学结构及生物活性 1 2 1 1 3 1 张郑瑶 ,段冷昕 ,周秋丽 ,新吉乐 ,蔺摇 勇 ,张摇 扬 (1. 吉林大学药学院生物药学系,长春 130022; 2. 河南科技大学药理系,洛阳471003; 3. 长春市中心医院,长春 130051) 摘要摇 在马鹿茸活性多肽结构与功能研究基础上,从新鲜梅花鹿茸中分离纯化了活性单体多肽,确定了其 化学结构,并与马鹿茸多肽进行结构与活性比较. 利用离子交换层析、凝胶过滤层析及反相高效液相色谱层 析等生物化学技术,从梅花鹿茸中分离得到1个新多肽,SDS鄄PAGE 电泳显示为一条带,HPLC 图谱为单一 峰,MALDI鄄TOF MS给出该多肽的精确分子量为3263郾4,其等电点pI=8郾15. 一级结构研究表明,该多肽是 由32个氨基酸残基组成的直链多肽,不含半胱氨酸,富含缬氨酸、赖氨酸、亮氨酸和甘氨酸,氨基酸序列为 VLSATDKTNVLAAWGKVGGNAPAFGAEALERM. 生物活性检测结果表明,该多肽可促进原代培养的表皮细 胞和软骨细胞增殖,也能刺激NIH3T3成纤维细胞株的分裂. 梅花鹿茸多肽与马鹿茸多肽在结构上均为32 个氨基酸残基组成的直链多肽,但第5,8,11和30位氨基酸残基不同. 2种多肽结构上的变化并未影响其 促细胞增殖生物活性. 关键词摇 梅花鹿茸;多肽;促细胞分裂 中图分类号摇 O629郾72 摇 摇 摇 摇 文献标识码摇 A摇 摇 摇 摇 DOI:10.3969/ j.issn.0251鄄0790.2012.09.022 鹿茸和人参是长白山主产的2种著名中药材,近60 年来人参的化学和药理学研究成果已为其临 床应用奠定了坚实的基础. 鹿茸作为临床治疗药物在我国已有几千年的历史,但鹿茸的化学和药理学 研究远不如人参那样广泛和深入,其作为中药资源至今未得到科学的利用和开发. 这是由于长期以来 人们一直未从鹿茸中找到其特有的生物活性物质,因此无法确定其切实的适应症和建立明确的鹿茸制 剂质量标准. 鹿茸快速生长的生物学特征使人们意识到,鹿茸中可能存在促进骨、上皮、血管及神经等组织生 长的活性物质. 目前已知的促进组织和细胞生长的活性物质多为蛋白质及多肽类,而鹿茸中蛋白质及 多肽的含量高达50%以上. 因此,从鹿茸多肽类物质中寻找和发现其特有的生物活性物质成为鹿茸研 [1] 究领域的新热点. 江润祥等 从梅花鹿茸表皮层半纯化表皮生长因子(Epidermal growth factor,EGF), [2] 其分子量在5500~13000之间. Garcia等 用半定量RT鄄PCR法检测鹿茸顶部不同组织中神经营养因 子(Neurotrophin鄄3,NT鄄3) mRNA 的相对表达,发现其在鹿茸顶部表皮层中的表达量最高,此结果与这 些组织中的神经分布情况一致. 多项研究证明,鹿茸多肽在体外可明显促进神经干细胞向神经元分 [3] [4] [5] 化 ,对大鼠坐骨神经损伤具有促进神经再生、加快神经轴生长的作用 . 段冷昕等 证明梅花鹿茸 [6,7] 多肽能明显促进人胚肝细胞株L鄄02有丝分裂,促进大鼠肝损伤修复. Sadighi和Luetteke等 证明在 马鹿茸顶部的非骨化部位存在大量的胰岛素样生长因子