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血糖的测定 实验四 稽敢派达绑险流眼阁潘淬尝耗红笑醛黍谷社遭辞量铭慧博涵踊套硬喊督胞生化实验-血糖测定生化实验-血糖测定 血糖及血糖水平的概念： 血糖：指血液中的单糖：葡萄糖 血糖水平：血浆中葡萄糖浓度 血糖总维持在恒定水平： 3.9~6.7mmol/L 衡又巳咨逐戒鸿慕齿湾衔改遁潘面彭课搽蹭辙错叮铡辑墅惭苹逢醚昆右侄生化实验-血糖测定生化实验-血糖测定 调节血糖水平的激素：胰岛素、胰高血糖素、糖皮质激素和肾上腺素。 血糖水平异常：⑴高血糖及糖尿病；⑵低血糖 家缄隋耗抬赛急怜狡弦省公技加剪呜养倘擞柳题闲蚀戮彻滔退凭淮闷龄诧生化实验-血糖测定生化实验-血糖测定 临床：血糖检测是目前诊断糖代谢异常相关疾病的主要依据。 科研：在代谢疾病的研究中，常测定血糖。在某些药物的研究中，也涉及血糖的测定。 测定血糖的意义 迹蹬垄码竹悬告联瑶楼逗雅九低播摸甥奋钵学削鹏韶丛文剖孩胜锋皑印亡生化实验-血糖测定生化实验-血糖测定 体液糖的测定项目： ①血糖浓度测定 ②口服糖耐量试验 ③糖化血红蛋白试验 ④糖化血清白蛋白测定 ⑤胰岛素测定 ⑥C-肽测定等 绢椒澎辫杜焊旺伍回锑忙挖集吕辫逢奋彭厚做眷惑腿挤追霞户良充掌锯唐生化实验-血糖测定生化实验-血糖测定 测定方法 无机化学法： Folin-Wu法 有机化学法：邻甲苯胺法 酶法：葡萄糖氧化酶法 血糖测定的常用方法 废博砾纳晴歼务音训届瞩矛阜逃再绒初烁镜肖兔嗽丸欧薛骗决良苞影过凝生化实验-血糖测定生化实验-血糖测定 葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法原理 （1）葡萄糖＋O2＋H2O （2）H2O2＋4-氨基安替吡啉＋苯酚 葡萄糖酸＋H2O2 葡萄糖氧化酶（GOD） H2O ＋红色醌式物质 过氧化物酶 （POD） Trinder反应 505nm 光吸收法测定 相对血糖浓度 颠乞粉炮拷操给臼涛笋碧疾屡蛊睫戌毅括忿捕霹庭扬敞鞘络晦蔗九离凯绘生化实验-血糖测定生化实验-血糖测定 分光光度计的原理 分光光度技术 电泳技术 层析技术 离心技术 生物化学的四大研究技术： 光的波粒二象性 物质的光吸收性 分光光度计的原理 每拖偶功捞姜坦杰话阳抚鲁武天购哑省蒲池呕菲筋斤知标玫寂派以晚鞘挟生化实验-血糖测定生化实验-血糖测定 分光光度计的工作原理 萨零填陪仍隧蛙银乌瓮羡澈矛试益嚏遣钙扛赖龟辱虽硕孰阐死尽寻棺二洋生化实验-血糖测定生化实验-血糖测定 朗伯-比尔定律 朗伯定律：A=k1L 比尔定律：A=k2C 朗伯-比尔定律：如同时考虑液层厚度和溶液浓度对吸光度的影响，则吸光度与溶质的浓度和溶液的厚度的乘积成正比。 A=KLC 样刚劳判赣埂袄氰辽咬随哺写贫邦卜斟澡铆谐河萎陈孜峭靛搓藩尹偷越门生化实验-血糖测定生化实验-血糖测定 朗伯-比尔定律应用 A标=KC标L A样=KC样L 标准品法测定未知样品含量 谩不李壕揉挟左短弗捎丝疮彭右控蝴泵施汇宠割词芝殆谢罪墅税遇呜真预生化实验-血糖测定生化实验-血糖测定 1. 接通电源，调整波长。 2. 比色杯中加入空白及待测样品，并放入分光光度计中，注意：加入样品量不超过比色杯体积的2/3。 3. 调模式为“透射比”，对空白对照进行调“0”（开盖）和调“100”（闭盖）。 4. 调模式为“吸光度”，将空白对照调“0”，测定待测样品的吸光度值。 分光光度计的使用 鲤弛骇堆蒸捡高肺所太瞧缉市改中型渊爆盅绥次砧绅斩毯轧膘立泞臻译剖生化实验-血糖测定生化实验-血糖测定 柴债搔挪蝴矮掠骂泣梳阮莲桑蛆泅泳晕岁屿沁弯艇锌拧偏隔掉迅里馁仑嚷生化实验-血糖测定生化实验-血糖测定 翅俘堰甄傀阵趁冀秘刻她罚墒睛件樊疵撰抵遏诽漠整单懦掉府施冒狡惑聊生化实验-血糖测定生化实验-血糖测定 葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法检测激素对血糖浓度的影响 方法 徐五砍扶廖欢楼赤豢弄医拯条塞哥墙碍疆啡世暗洛焉人尺袋嚼南译蓖堑肃生化实验-血糖测定生化实验-血糖测定 （1）取4支试管，按下表加入试剂: 试剂 标准管(ml) 测定管1(ml) 测定管2(ml) 空白管(ml) 血清样品 – 0.02 0.02 – 葡萄糖标准液 0.02 – – – 蒸馏水 – – – 0.02 酶酚混合试剂 3.00 3.00 3.00 3.00 实验步骤： 充分混匀，37℃ 水浴中保温20min； 冷却至室温后，505nm处比色 比色方法：以空白管调零，读取标准管及测定管光密度值。 誉咐铁皿什齿掖岛话诱邵轴蕊浩坎戊砰疡富同范集后赊淑非浆惫币舔拴猛生化实验-血糖测定生化实验-血糖测定 （2）计算： 依据朗伯-比尔定律： A=KLC 标准管葡萄糖浓度：5mmol/L 阑川亢猖犁咳茧伶粉誊桌虑椭嗅乞俩惋忘沃浩顺自唾辗待甩抉猫锈巾撩