微生物培养与保藏,步骤与注意点.pptVIP

微生物的培养与保藏;1．称量按照培养基的配方，准确称取各成份于烧杯中 2．溶化向上述烧杯中加入所需要的水量，搅动，然后加热使其溶解。按其配方的浓度加热煮沸半小时，并用纱布过滤，然后加入其它成份继续加热使其溶化，补足水量，如果配方中含有淀粉，则需先将淀粉加热煮融，再加入其它药品，并补足水量。 3．调pH：　pH7．6　 4．过滤：这一步可以省去。 5．分装：分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。 6．加塞 7．包扎 8．灭菌 9．倒平板 10．无菌检查：将灭菌的培养基放入37℃的温室中培养24—48小时，以检查灭菌是否彻底。 ;(1)倒平板 溶化牛肉膏蛋白胨琼脂培养基倒平板，水平静置待凝。(2)在酒精灯光焰上灼烧接种环，待冷，取一接种环金黄葡萄球菌、大肠杆菌混合菌液。 (3)左手握琼脂平板稍抬起皿盖，同时靠近火焰周围，右手持接种环伸入皿内，在平板上一个区域作之形回划线，划线时例接种环与平板表面成30-40°角度轻轻接触，以腕力在表面作轻快的滑动，勿使平板表面划破或嵌进增基内。(4)灼烧接种杯，以杀灭接种环上尚残余的菌液，待冷却后，再将接种环伸入皿内，在第一区域划过线的地方稍接触一下后，转动90°，在第二区域继续划线。 (5)划毕后再灼烧接种杯，冷却后用同样方法在其他区域划线。 (6)全部划线完毕后，在平皿底用特种蜡笔注明菌种、日期、组别、姓名。将整个培养皿倒置放入恒温箱培养。 ;殉芜腹警匈券省欧貌诊屹奴翘笑桐伯半畜恒钧谨搬税妨望熟葱刀赊叉陆梨微生物培养与保藏,步骤与注意点微生物培养与保藏,步骤与注意点;盘凋愤株悬螟邱郎禾艰拦毖守冠邵膜没捣笨锭尊赚暗赎馆漫综蓟磊纲谅党微生物培养与保藏,步骤与注意点微生物培养与保藏,步骤与注意点;(1)操作前，先用75%酒精擦手，待酒精挥发后点燃酒精灯。 (2)将菌种管和斜面握在左手大姆指和其它四指之间，使斜面和有菌种的一面向上，并处于水平位置。 (3)先将菌种和斜面的棉塞旋转一下，以便接种时便于拔出。(4)左手拿接种环(如握钢笔一样)，以火焰上先将环端烧红灭菌，然后将有可能伸入试管其余部位也过火灭菌。(5)用右手的无名指、小指和手掌将菌种管和待接斜面试管的棉花塞或试管帽同时拔出(图7-1.2)，然后让试管口缓缓过火灭菌(切勿烧过烫)。(6)将灼烧过的接种环伸入菌种管内，接种环在试管内壁或未长菌苔的培养基上接触一下，让其充分冷却，然后轻轻刮取少许菌苔，再从菌种管内抽出接种环。(7)迅速将沾有菌种的接种环伸入另一支待接斜面试管。从斜面底部向上作“Z”形来回密集划线。有时也可用接种针仅在培养基的中央拉一条线来作斜面接种，以便观察菌种的生长特点。(8)接种完毕后抽出接种环灼烧管口，塞上棉塞。(9)将接种环烧红灭菌。放下接种环，再将棉花塞旋紧。 ;率两瘫岿几我瑚氖账峻缎诧竹猩凑绍碗手狭钵河绥屿跋搓数桩丙控今钧焰微生物培养与保藏,步骤与注意点微生物培养与保藏,步骤与注意点;;1.加热溶化过程中，要不断搅拌，加热过程中所蒸发的水分应补足。 2.pH值必须按各种不同培养基的要求准确测定。 3. 所用器皿要洁净，勿用铜质和铁质器皿。 4. 分装培养塞时，注意不得使培养基在瓶口或管壁上端粘染，以免引起杂菌污染。 5. 培养基的灭菌时间和温???，需按照各种培养基的规定进行，以保证杀菌效果和不损失培养基的必要成份，培养基灭菌后，必须放在37℃温箱培育24小时，无菌生长方可使用。 ;① 挑选特征典型的纯菌菌落； ②确定保藏的合适菌体形态； ③ 选择最适宜的保藏方法； ④定期对保藏菌种进行检查，观察是否发生变化，若有变化，须改变保藏方法。保藏期满应及时进行移种。 ;1.保藏的菌种应是生命活力旺盛的新鲜培养物，至少应是第三代的培养物。 2.保藏过程中，需经常观察斜面是否干燥，如干燥， 需重新移种。 3.必须定期检查保藏菌种冰箱的温度、湿度以及菌种管的棉塞是否松动或生霉，如有异常应及时处理。 4.每次移植后，应与原菌种的编号、名称逐一核对，确证培养基特征和纯度无误后再继续保藏。 5.保藏菌种的培养基应无糖，其他菌类含糖小于 2 %为宜，以免产酸过多，影响菌种存活。 6.保藏时，用新鲜培养物接种，应检查纯度和特征 后，方可进行保藏。;谢谢！