石菖蒲、肉豆蔻、橘皮挥发油对雪上一枝蒿总碱经皮渗透的影响论文.docVIP

　　石菖蒲、肉豆蔻、橘皮挥发油对雪上一枝蒿总碱经皮渗透的影响论文 .freela Acori Tatarinoen Myristicae (SM) and Pericarpium Citri Reticulatae (PCR) on percutaneous peration of total alkali of Shortstalk Monkshood Root through mouse skin in vitro. Methods By using an improved Franz diffusion cells, the effects of these 3 kinds of volatile oil on the percutaneous peration of total alkali of Shortstalk Monkshood Root ulative amount of Bullatine A ined by HPLC. Results 7% (v/v) volatile oil RTA and SM, 5% (v/v) volatile oil of PCR and 3% (v/v) Azone ent ratios a Acori Tatarinoen Myristicae；volatile oil of Pericarpium Citri Reticulat 雪上一枝蒿总碱含有一枝蒿甲、乙、丙素等二萜类生物碱,是毛茛科植物雪上一枝蒿的主要成分,具有镇痛、抗炎、镇静的功效,民间和临床上常用雪上一枝蒿药材外敷治疗各类疼痛。本研究以雪上一枝蒿总碱为模型药,以石菖蒲、肉豆蔻、橘皮中所含挥发油为促渗剂,用氮酮进行阳性对照,并以雪上一枝蒿甲素为指标,考察对雪上一枝蒿总碱经皮渗透的影响,为芳香开窍药、理气药类中药促渗剂的研究与开发提供实验依据。 1 实验材料 1.1 动物 昆明种小白鼠(云南中医学院实验动物中心提供,许可证号：2004-16),体重(20±2)g,雌雄兼用。 1.2 药物与试剂 雪上一枝蒿甲素对照品(中国药品生物制品鉴定所)；雪上一枝蒿甲素为毛茛科植物短柄乌头Aconitum brachy podum Diels.的主要成分(中国科学院昆明植物所提供,李锡文鉴定)；石菖蒲为天南星科多年生草本植物石菖蒲Acorus gramineus Soland.根茎；肉豆蔻为肉豆蔻科植物肉豆蔻Myristica fragrans Houtt.的成熟果仁；橘皮为芸香科植物橘Citrus reticulata Blanco的栽培变种的成熟新鲜果皮(云南省药材公司,由云南中医学院生药教研室鉴定)。8% Na2S溶液、生理盐水、70%乙醇、磷酸盐缓冲液,均为分析纯、甲醇为色谱纯。 1.3 仪器 TK-12B透皮扩散试验仪,上海锴凯科技贸易有限公司产品；高效液相色谱仪,德国Agilent1100Series(DAD)；电子分析天平(Precisa Xs125A,d＝0.000 1 g)；KUDOS-SK250HP超声仪(上海科导超声仪器有限公司)。 2 实验方法 2.1 挥发油提取 石菖蒲经水蒸气蒸馏得到淡黄色的油状液体,收率为0.6%；肉豆蔻经水蒸气蒸馏后得到淡黄色油状液体,收率为1.36%；橘皮经水蒸气蒸馏得到近无色油状液体,收率为0.66%。 2.2 供试液的配制 精密称取雪上一枝蒿总碱,用少量稀盐酸(pH＝1)溶解,加入70%乙醇定容,配成浓度为30 mg/mL的空白雪上一枝蒿甲素溶液。同法另配4份,分别加入氮酮、石菖蒲、肉豆蔻以及橘皮挥发油,配制成不同浓度的供试药液。实验时,取上述5份样品液各1 mL,放入供给池进行透皮扩散实验。 2.3 高效液相色谱法测定雪上一枝蒿甲素含量 2.3.1 色谱条件 色谱柱：Eclipse XDB-C18 (250 mm×4.6 mm, 5 μm)；流动相：乙腈-磷酸盐缓冲液(10∶90)；流速：1.0 mL/min；波长为214 nm。在此条件下,样品峰分离较好,且挥发油无干扰,色谱图见图1、图2。样品中雪上一枝蒿甲素的保留时间为8.5 min,分离度大于1.5。 2.3.2 标准曲线的制定 精密称取一定量的雪上一枝蒿甲素,用少量稀盐酸(pH＝1)溶解,12 h空白皮肤液定容,配成一系列不同浓度的溶液(0.013、0.065、0.13、0.26、0.39、1.04 mg/mL),进样量10 μL。以峰面积为横坐标,进样量(mg/mL)为纵坐标,进行线性回归,得回归方程：Y＝2 058.6X－13.555,r＝0.999 9,线性范围为0.013～1.04 mg/mL。 2.3.3 回收率试验 取12 h已知浓度的样品皮肤透过液6份,加