疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝细胞PI3K p85α蛋白表达的影响论文.docVIP

　　疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝细胞PI3K p85α蛋白表达的影响论文 杨钦河 欧健 孙升云 乔娜丽 程少冰 陈万群 金玲 杨环文 李娜 纪桂元 谢维宁 林秀峰 张玉佩 薛川松 【摘要】 目的 观察疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）大鼠肝细胞磷脂酰肌醇3激酶p85α(PI3K p85α)表达的影响。方法 以高脂饮食12周建立大鼠NAFLD模型后，造模组大鼠再随机分为模型组、疏肝组、健脾组、综合组和自然恢复组等5组。治疗组分别给予相应药物灌胃，其他组给予等量蒸馏水灌胃，模型组继续高脂饮食，其余均予基础饲料喂养。治疗8周后，用3%戊巴比妥腹腔麻醉，腹主动脉取血，全自动生化仪检测血脂及肝功.freelL）×空腹血糖（mmol/L）/22.5，计算值取自然对数变换。 1.6.2 组织病理学检查 取固定液固定的肝组织，大小约2 cm×2 cm×0.3 cm，常规石蜡包埋，切片，HE 染色，光镜下观察肝脏组织学变化。 1.6.3 肝细胞内PI3K p85α的检测 肝组织石蜡切片用免疫组化（SABC法）方法检测PI3K p85α在肝细胞中的表达及分布情况。 1.7 统计学方法 计量资料以（±s）表示，组间比较采用单因素方差分析，PI3K p85α阳性率的比较用χ2检验及Fisher’s确切概率检验。 P＜0.05有统计学意义。所有数据均采用SPSS13.0统计软件进行统计分析。 2 结果 2.1 各组大鼠血清TC、TG、HDLC、LDLC的变化 与正常组相比，模型组TC、TG、LDLC较正常组显著升高（P＜0.01），HDLC显著降低（P＜0. 05）；与模型组相比，各药物治疗组及自然恢复组均显著降低TC、LDLC（P＜0.01）及TG（P＜0. 05），升高HDLC（P＜0.05），提示调整饮食结构可能对NAFLD的早期具有重要意义。见表1。 2.2 各组大鼠血清ALT、AST、FFA和ApoB100的变化 与正常组相比，模型组ALT、AST、ApoB100均显著升高（P＜0.01），FFA明显增加（P＜0.05）；与模型组相比，药物治疗组及自然恢复组ALT、AST、FFA均显著降低（P＜0.01，P＜0.05）；药物治疗各组ApoB100显著降低（P＜0.01），提示疏肝健脾方药可能对脂质代谢具有进一步的潜在作用。见表2。 2.3 各组大鼠空腹血糖、胰岛素及胰岛素抵抗指数的变化 与正常组比较，模型组血糖、胰岛素及胰岛素抵抗指数均显著升高（P＜0.05）。与模型组相比，各用药治疗组及自然恢复组均可显著降低血糖、胰岛素及胰岛素抵抗指数（P＜0.05）。与自然恢复组相比，药物治疗组胰岛素、胰岛素抵抗指数均有明显降低（P＜0.05），提示所造大鼠NAFLD模型存在IR。见表3。 表1 各组大鼠血脂的变化（略） Table 1 parison of the levels of blood lipid in different groups 与正常组相比:*P＜0.05, **P＜0.01；与模型组相比:▲P＜0.05，▲▲P＜0.01 表2 各组大鼠肝功、FFA和ApoB100的变化（略） Table 2 parison of the levels of serum ALT, AST, FFA and ApoB100 in different groups 与正常组相比:*P＜0.05，**P＜0.01；与模型组相比:▲P＜0.05，▲▲P＜0.01 表3 各组大鼠空腹血糖、胰岛素及胰岛素抵抗指数的变化（略） Table 3 parison of FPS, insulin and insulin resistance index in different groups 与正常组相比:*P＜0.05；与模型组相比:▲P＜0.05；与自然恢复组相比:★P＜0.05 2.4 各组大鼠肝组织学变化 大体观察：模型组大鼠肝脏体积明显增大，包膜紧张，色泽较正常组暗淡，整体呈苍黄色，可见局灶黄白色变性灶，质地偏硬，切面油腻。其他各组大鼠肝体积均有不同程度的增大，呈淡黄褐色，质地、弹性和韧性均较正常组略差。其中，疏肝组、健脾组、综合组要好于自然恢复组。 光镜下正常组大鼠肝脏肝小叶结构清晰，细胞索排列整齐。模型组大鼠肝小叶界限不清，肝细胞索排列紊乱，肝窦消失，出现弥漫性脂肪变性，胞浆中可见大小、数量不一的脂滴空泡，甚者脂滴互相融合，将胞核挤向一侧；小叶内炎症较重，部分大鼠可见数个炎症坏死融合成片。 疏肝组、健脾组、综合组病理改变大致相同，表现为肝细胞轻度脂肪变。自然恢复组大鼠肝组织脂肪变程度较模型组明显减轻，但不如其他药物治疗组改善明显。