外泌体中miR-21的研究.pptVIP

Cardiac progenitor cell-derived exosomes prevent cardiomyocytes apoptosis through exosomal miR-21 by targeting PDCD4 Cell Death and Disease 2016 PART 01 论文导读 Introduction PART 02 材料方法 Materials and methods PART 03 实验结果 Results PART 04 总结分析 Analysis and Conclusion * 目录 Contents * 第一部分：论文导读 第一部分：论文导读 论文导读 Introduction 第一部分 心肌祖细胞（Cardiac progenitor cell） 心肌祖细胞，成年人心脏的一种干细胞， 外泌体（exosomes） 细胞内分泌的一种膜性囊泡（30-100nm），可通过胞间的信息交流与物质（蛋白质、细胞因子转录因子和miRNA等）传递从而介导受体细胞中各种重要的生理过程。 * 第二部分：材料方法 材料方法 Materials and methods 使用免疫磁珠分选法从实验鼠心脏中分离筛选出心肌祖细胞 细胞培养液的上清中分离出外泌体并进行纯化和鉴定（TEM, NTA, Western Blot） 双氧水刺激心肌祖细胞以分析外泌体的分泌情况，刺激普通心肌细胞以分析细胞凋亡情况 分析外泌体中miRNA的差异表达情况 材料方法 Materials and methods 第二部分：材料与方法 第二部分：材料与方法 技术路线 分离出心肌祖细胞并离体培养 细胞上清液中分离外泌体并鉴定 在氧化应激状态下分析其对心肌祖细胞外泌体的分泌情况 氧化应激会引起普通心肌细胞的早期凋亡 差异表达miRNA的验证及表达谱分析 预测和验证miR-21的靶基因（PDCD4） 高通量测序及数据分析 差异表达miRNA的靶基因预测及验证 差异表达miRNA靶基因的功能分析及验证 构建动物模型进行体内验证 实验结果 Results 第三部分：实验结果 第三部分：实验结果 分离提取得到确认是外泌体 第三部分：实验结果 b 氧化应激会提高外泌体的分泌量，且会诱导心肌细胞的凋亡 第三部分：实验结果 氧化应激下CPC源外泌体中的miR-21表达上调，可能参与阻止心肌凋亡的过程 第三部分：实验结果 第三部分：实验结果 MiR-21通过靶向PDCD4来抑制H9C2的凋亡 第三部分：实验结果 CPC源的外泌体修复miR-21-PDCD4信号通路并且减弱氧化应激下心肌细胞的凋亡 第四部分：方法分析 方法分析 Method Analysis 第四部分：方法分析 双氧水的刺激能模仿细胞内真实的氧化应激否？ 第五部分：谢谢聆听 * *