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马氏珠母贝群体内遗传多样性的ISSR分析-中国科学院南海海洋研究所
维普资讯 第 26卷 第 5期 海 洋 通 报 Vb1.26,No.5 2007年 10月 MARINESCIENCEBULLETIN Oct.2007 马氏珠母贝群体内遗传多样性的 ISSR 分析 姜因萍 2,何毛贤 ,林岳光 (1.广东省应用海洋生物学重点实验室,中国科学院南海海洋研究所,广东 广卅I510301 2.安徽中医学院,安徽 合肥 230038) 摘 要:采用 ISSR分子标记技术,对一马氏珠母贝养殖群体中个体大和个体小的两个组的遗传多样性进行分析。5个引物在 2个 组 100个样品中共得到 72个清晰的扩增位点,其中多态性位点 71个,多态位点百分率 (PPB)为98.61% POPGENE分析结 果表明:个体大的组的遗传多样性水平高于 (PPB=94.44%,I=0.3523,h=0.2181,na:1.9444)小个体组 (PPB=80.61%.I=0.3008, h=0.1915,na :1.8056)。两组间的遗传分化系数 Gst=0.0948。UPGMA聚类分析表明大个体组内几乎所有的贝 (47个 )聚在一 起,而小个体组的贝 (50个 )聚成另一支。 关键词:马氏珠母贝;遗传多样性:ISSR分析 中图分类号:Q178.53 文献标识码:A 文章编号:1001.6932(2007)05.0062.0005 马氏珠母贝 (又称合浦珠母贝,PinctadamartensiiDunker)属于软体动物门双壳纲珍珠贝目珍珠贝 科,是重要的海水养殖贝类和生产珍珠的主要母贝。在中国,马氏珠母贝分布在广西、广东和台湾海峡南 部沿海一带。20世纪 60年代中国已成为马氏珠母贝养殖珍珠的出口国。近年来,由于过度捕捞与养殖 环境的恶化等影响,我国的近海马氏珠母贝物种资源受到严重破坏,人工养殖品种个体变小,育珠质量下 降,严重阻碍水产养殖业的健康发展。要改变这种局面,必须开展马氏珠母贝的种质资源保护和种质改 良。 对马氏珠母贝遗传多样性的研究仅见王爱民 】【】、丁小雷L3】不同地理群体多样性的研究。传统的贝类育种主 要是根据其表观性状 (如贝壳的大小、颜色等 )进行的,但仅依据生长快、个体大这些表观性状进行育 种存在很大的盲 目性。因此,利用分子遗传标记技术研究马氏贝的遗传多样性参数,可以为在马氏珠母贝 遗传育种中的指标选择提供理论依据。 ISSR (inter-simplesequencerepeats)是由 Zietkiewicz4【提出的一种新型分子标记技术,用于检验 SSR(simplesequencerepeat)间DNA 序列差异。由于 ISSR技术不仅可以快速、高效和灵敏地检测出基 因组DNA 的多态性,有很好的重复性,而且操作简单、成本较低 ,适合大样本的检测,在种群遗传学、 种质资源、分类学与种系发生学等方面得到迅速应用[5-61。近年来 ISSR标记应用于植物遗传多样性方面 的研究比较多,应用于动物遗传多样性研究已有一些报道L7】。本研究利用 ISSR 分析技术对从同一养殖 群体中个体较大和个体较小的贝的遗传多样性进行分析 比较,旨在揭示同一群体中个体大小的遗传变异, 为马氏贝的人工育种工作提供理论支持。 1 材料与方法 1.1 材料 从来源于同一亲本的马氏珠母贝人工养殖群体 (约 5月龄 )中随机取 500个贝,从中选取个体较 大的 50个贝作为一组,简称大贝组 (D);个体较小的 50个作为另一组,简称为小贝组 (X)。测量两 组的长、高、宽、体重、壳重。取其肌肉,用 75% 的酒精固定,存放于 .4℃ 用于 DNA提取。 收稿日期:2006.10.24;收修改稿 日期:200706.21 基金项 目:国家 “863”计划资助项 目 (2006AA10A409),广东省科技计划项目 (2006 维普资讯 5期
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