紫外可见分光光度计试验指导.pptVIP

许多有机化合物在紫外具有特征的吸收光谱，从而可以用来进行有机物的鉴定及 结构分析（鉴定有机化合物的官能团）；此外，还可对同分异构体进行鉴别。对具有π健电子及共轭双键的化合物特别灵敏，且在紫外光区具有强烈吸收。该法在有机物分析中可进行： （1）纯度检查； （2）未知样品的鉴定； （3）分子结构的推测； （4）互变异构的判别； （5）定量测定。 五、试剂配制 1、 配制标准系列：取酚标准溶液0.1mg/mL0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mL分别置于50.00mL 容量瓶中，各加10 滴10%NaOH 水溶液，用水稀释至刻度； 2、 绘制吸收曲线：用1cm 石英比色皿，在波长240～300nm 内每间隔4nm，以空白为参比，测定标准系列中3 号（或4 号）的吸光度A，绘制吸收曲线，找出最大吸收波长λ max。 3、标准曲线：用1cm 石英比色皿，在选定的最大吸收波长下分别测定标准系列的吸光度，绘制标准曲线，以空白为参比。 4、 测定未知液：取未知液10.00mL 置于50.00mL 容量瓶中，加10 滴10% Na OH 水溶液，用水稀释至刻度；用1cm 石英比色皿，在最大吸收波长处测定吸光度A，以空白为参比。 5、 计算未知液的含量（mg·mL-1）。 六、仪 器 操 作 T6-紫外可见分光光度计 1、仪器安装环境 2、仪器正面 3、仪器侧面 4、仪器背面 5、键盘布局 6、主菜单界面 7、设定工作波长 8、样品池设定 9、自动校零 10、测量后显示的状态 11、数据打印 12、功能扩展 七、仪器使用注意事项： 仪器操作过程出现异常情况，不得私自关闭电源，需由教师指导完成。 实验室内不准来回跑动。 不准随意搬动仪器。 再测量状态下，不得将手伸入测量室内，以防紫外线灼伤！ 不准私自调整实验室空调的设定温度及风速。 T6 紫外-可见分光光度计价值人民币19000元，石英比色皿每对价值人民币 370元，同学操作时请注意爱护仪器，如有人为损坏需照价赔偿。 八、思考题： 为什么同浓度溶液，每次测量后读数会发生细微变化？ 紫外分光光度法与可见分光光度法有些什么区别？ * * 实验 吸收曲线、工作曲线绘制 及样品中芳香族化合物的测定 一、实 验 目 的 1、了解紫外吸收光谱在有机结构 分析的应用。 2、学习有机物的定量分析方法。 比耳定律 当入射光的波长、液层厚度和溶液的温度固定时, 溶液的吸光度与溶液的浓度成正比。 朗伯特定律 当入射光的波长、溶液的浓度及温度一定时,溶液的吸光度与液层的厚度成正比。 二、实验原理 三、仪器组成  紫外 - 可见光度计仪器由光源、单色器、吸收池和检测器四部分组成。 1、光源  对光源基本要求：足够光强、稳定、连续辐射且强度随波长变化小。  （1） 钨及碘钨灯： 340～2500 nm ，多用在可见光区；  （2） 氢灯和氘灯： 160～375nm ，多用在紫外区。 2、单色器 (Mnochromator)  与原子吸收光度仪不同，在 紫外可见分光光度计中，单色器通常置于吸收池的前面！ (可防止强光照射引起吸收池中一些物质的分解) 单色器： 是分光光度计的关键部件，主要任务是将光源发来的混合光分解为单色光，并提供所需波长的光。 3、吸收池 (Cell ， Container) ：  用于盛放样品。可用石英或玻璃两种材料制作，前者适于紫外区和可见光区；后者只适于可见光区。有些透明有机玻璃亦可用作吸收池。 4、检测器： 硒光电池 光电二极管 光电倍增管 四、实验仪器与试剂 1、仪器： T6 型紫外-可见分光光度计；1cm 石英比色皿 2、试剂： 苯酚，10%NaOH