紫外光谱法测咖啡因.docVIP

紫外光谱法测咖啡因 实验设计 设计人：郭金勇 用紫外光谱法测量咖啡因实验计划 摘要: 茶叶是人类最佳的天然保健材料，茶叶中含有机化合物450多种，无机矿物质15种以上，及人体必需的营养成分和药用成分，茶对血管硬化，高血压、动脉粥样硬化、放射损伤、肿瘤、免疫功能降低的防治都有效，寓保健、养生、防癌功能于品茗之中，这是其他饮料无法取代的。 茶叶中含有多种生物碱，其中主要成分为咖啡因，少量的咖啡因可以使身体处于兴奋之中。刺激机体的中枢神经系统，诱发肾上腺素释放入血，增加机体血糖水平，注意力集中，过量的咖啡因可以使精神疲倦，身体发颤，难以入睡，刺激胃黏膜，一般成年男性消耗200mg咖啡因，多则无益，因此研究茶叶中咖啡因含量，有助于我们更好的对茶有新的认识。 茶叶中咖啡因含量测定曾是国内外的热门。常用的方法有液相色谱法或者紫外分光光谱法。这里我采用紫外分光光谱法，主要原因是紫外分光光谱法方法简单，快速稳定、准确、灵敏度高、干扰物排除能力强，物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子 、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同，因此，每种物质就有其 特有的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或 测 定该物质的含量，这就是分光光度定性和定量分析的基础。分光光度分析就是根据物质的吸 收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。 　紫外可见分光光度法的定量分析基础是朗伯-比尔(Lambert-Beer)定律。朗伯定律是说明光的吸收与吸收层厚度成正比，比耳定律说明光的吸收与溶液浓度成正比；如果同时考虑吸收层厚度和溶液浓度对光吸收率的影响，即得朗伯-比耳定律。1.仪器:蒸发皿，紫外分光光度计2.试剂: ，咖啡因标准样品(纯度98%以上)，咖啡因标准储蓄液(0.5mg·ml-1): 　准确称取咖啡因对照品若干 ,溶于无水乙醇中,将溶液转入100 mL 容量瓶中,分别用无水乙醇稀释至刻度,在200 ～300 nm 之间用紫外分光光度计进行波长扫描,在273 nm 处;咖啡因在无水乙醇中有最大吸收波长。 2、咖啡因标准曲线绘制: 从无水乙醇为溶剂的咖啡因储备液( c = 500. 0μg/ mL) 中移取适量标准品于7 个50 mL 容量瓶中用无水乙醇定容,得到浓度为2. 00 ,4. 00 ,6. 00 ,8. 00 ,10. 00 ,12. 00 ,14. 00μg/ mL 的系列标准溶液。在紫外分光光度计上测其在273 nm处的吸光度A ,得标准曲线。 把去年实验从茶叶中提取的咖啡因溶解在乙醇中，转入100mL 容量瓶中,冷却至室温,用无水乙醇定容,用1cm 比色皿在273 nm 处测吸光度,然后按标准曲线,算出其浓度。 五、实验注意事项1.移取溶液必需切确.石英比色皿每次测定前利用试液清洗三次 紫外光谱法