第章 色谱分离原理.pptVIP

第18章 色谱法导论 18-1 概述 18-2 色谱基本术语 18-3 色谱法基本理论 18-4 分离度 18-5 定性和定量分析 18-1 概述 色谱发展简史 色谱法在工业生产和科学研究中的作用 色谱法的定义与分类 一、 色谱发展简史 色谱法的出现 色谱法的发展 色谱法的现状和未来？ 色谱法的出现 1903年 Tswett （茨维特）研究植物叶子组成时发明了色谱法 色谱法的出现 1903年 Tswett （茨维特）研究植物叶子组成时发明了色谱法 1906年 Tswett 的研究成果发表 Chromatographie (德语） Chromatography (英语） 色谱 玻璃管=“色谱柱”column 碳酸钙=“固定相”stationary phase 石油醚=“流动相”mobile phase 色谱法的发展 1931年 Kuhn 等用氧化铝和碳酸钙分离了α-,β-,γ-胡萝卜素等60多种植物色素 1941年 Martin 和 Synge建立了液液分配色谱法并提出气相色谱的设想 1952年 Martin等发明了气液色谱法 1952年 Martin 和 Synge 获得诺贝尔化学奖 A.J.P. Martin R.L.M. Synge 气相色谱仪 色谱法的发展 1957年Goley开创了毛细管气相色谱 1960年代末出现高效液相色谱法 1980年代超临界流体色谱得到发展 1980年代Jorgeson发展了高效毛细管电泳 1990年代后期毛细管电色谱得到重视和发展 高效液相色谱仪 毛细管电泳仪 液相色谱分离速度的变化 色谱法的现状和未来 气相色谱和高效液相色谱发展最好 超临界流体色谱处于失利地位 毛细管电泳与毛细管电色谱处于研究阶段,进入部分应用领域 气相色谱和高效液相色谱发展最好 气相色谱仪及备件 全球市场: 约10亿美元/年; 3-4%年增长 高效液相色谱仪及备件 6-8%年增长 超临界流体色谱处于失利地位 发展晚于GC和HPLC 虽然具有一些独特用途，但大多数功能可由GC和HPLC代替 毛细管电泳与毛细管电色谱 为基因组学研究作出了杰出贡献 目前存在的主要问题： 分析结果偏差大 比HPLC大一个数量级 机遇：分离分析生物大分子 成功的定量分析方法应具备的基本条件 易于使用，操作费用低 能够得到准确、可重复的定量结果 要能够解决至少一个分析化学中的重要问题 色谱法在工业生产和科学研究中的作用 1930-1940年代为分离复杂的生物组成发挥了独特作用 1950年代为石油工业的发展作出了贡献 1960-1970年代成为石油化工、化学工业等部门的分析检测手段 目前，色谱法已成为生命科学、医药科学、环境科学、材料科学、食品科学、法庭科学以及航天科学等研究领域的重要手段 面临的问题 当今化学、生命科学、环境科学等研究领域中备受人们关注的热点问题，如蛋白质组学、代谢组学中的分离分析问题的解决，医学中的药理、药物代谢研究和疾病标记物研究，天然产物有效成分的分离分析，食品安全，毒品、兴奋剂等快速检测等等。 发展趋势 进一步发展高效分离技术 小型化、微型化、自动化 各种联用技术 样品处理技术 高通量 超高效液相色谱（UPLC） 超高效液相色谱（UPLC） 芯片液相色谱 ZORBAX 300SBC18 5 μm particles H.-F. Yin et al., presented at the 18th International Symposium on Microscale Separations and Analysis, HPCE, San Diego, January 2003. 多肽分离图 自动化 分离分析新技术简介 毛细管电泳 全二维气相色谱 液相色谱－气相色谱联用 液相色谱－液相色谱联用 色谱－质谱联用* 样品处理技术 毛细管电泳 毛细管电泳是指溶质以电场为推动力，在毛细管中按淌度差别而实现的高效、快速分离的新型电泳技术。 高效毛细管电泳的特点 与传统电泳技术及现代色谱技术相比： 仪器简单、操作方便、易自动化 分离效率高(105 - 107 块/m) 、分析速度快 操作模式多 实验成本低，消耗少 重现较差，分析结果误差大 毛细管电泳示意图 多维气相色谱 全二维气相色谱 全二维气相色谱 液相色谱－气相色谱联用 液相色谱－气相色谱联用 液相色谱－液相色谱联用 液相色谱－液相色谱联用模式 同模式 LC–LC 多模式 LC–LC 全二维 LC (i) 样品的每一部分均经过二维分离。 (ii)样品的所有组分等比例经过二维分离。 (iii) 第一维具备分离能力。 全二维 LC 固相微萃取技术 固相微萃取技术 固相微萃取技术 固相微萃取技术 固相微萃取技术 固相微