VEGF和MMP-2在卵巢乳头状癌组织中表达特征及-现代仪器与医疗.PDFVIP

《现代仪器与医疗》 2016年  第22卷   第6期 检验检测 VEGF和MMP-2在卵巢乳头状癌组织中 表达特征及临床意义 张永波　胡远强 （宜昌市第二人民医院肿瘤医院放化疗四科，湖北宜昌　443000 ） [ 摘　要 ]　目的 ：探讨卵巢乳头状癌组织中VEGF 和MMP-2 的表达特征，与卵巢乳头状癌发生侵袭、转移 的相关性。方法 ：利用实时定量聚合酶链反应(QT-PCR )、免疫组织化学染色法、Western blot 法检测VEGF/ MMP-2 基因及蛋白在正常卵巢组织、卵巢乳头状癌组织中的表达情况。结果 ：与正常卵巢组织相比，在卵巢乳 头状癌组织中，VEGF/MMP-2 基因和蛋白的表达量均明显升高，差异具有统计学意义(P ＜0.05 )。对比I-II 期 和III-IV 期，在III-IV 期VEGF/MMP-2 基因和蛋白的表达也明显升高，差异具有统计学意义(P ＜0.05 )。结论： VEGF/MMP-2 的高表达可能与卵巢乳头状癌的侵袭和转移密切相关。 [ 关键词 ]　卵巢乳头状癌；VEGF ；MMP-2 ；侵袭和转移 中图分类号：R737.31　文献标识码：A　文章编号：2095-5200(2016)06-111-03 DOI：10.11876/mimt201606041 卵巢癌是女性患者中死亡率最高的一类恶性肿 酸盐修复液（福州迈新生物技术有限公司）； RNeasy 瘤[1] ，最常见的类型是卵巢乳头状癌。而卵巢癌高死亡 FFPE Tissue Kit 试剂盒（厦门艾德生物医药科技有限公 率的主要原因[2] 是70% 左右的病例确诊时已有卵巢癌 司）；Maxima SYBR Green QT-PCR Master Mixes（Thermo 的浸润、盆腹腔的转移，无法手术和放疗。肿瘤发生转 Fisher Scientific ）；HiFi-MMLV Two Step RT-PCR Kit 移和侵袭的两个重要环节就是新生血管形成与细胞外基 （北京康为世纪生物科技有限公司）；DL1000Protein 质金属降解[3] 。血管内皮生长因子 (Vascular endothelial Marker （TaKaRa ）；组织蛋白提取试剂盒（上海经科化 growth factor ，VEGF) 是一种多功能的细胞因子[4-5] ，可 学科技有限公司）；ECL 显色试剂盒（Thermo ）；PBS 以增强癌组织中内皮细胞的增生，促进新生血管的形 缓冲液（pH7.2 ～7.4 ）（福州迈新生物技术有限公司）。 成，同时增加肿瘤中血管的通透性，促进癌细胞进入 1.2　方法 血管的过程，提高其浸润和侵袭的能力。基质金属蛋 1.2.1　标本来源　收集我院从2013 年 1 月至2015 年 白酶（Matrix Metalloproteinases, MMPs ）是一种锌离子 6 月期间具有完整的临床资料、经手术和病理检查诊断 依赖的高度保守的内切蛋白水解酶家族，包括MMP1- 明确卵巢乳头状癌且术前均未行放、化疗的病例80 例， MMP26 等26 个成员，能有效降解血管基底膜及细胞 正常卵巢组织49 例。临床资料包括患者的姓名、年龄、 外基质的各种蛋白成分，从而破坏阻碍癌细胞侵袭的组 有无浸润和转移等。卵巢乳头状癌病理诊断由两位高年 织学屏障[6] 。而MMP-2 [7] 具有降解基膜Ⅳ型胶原的能力， 资病理医师复阅切片，不一致病例由第三名医师进行评 一直是卵巢乳头状癌转移和浸润机制的研究热点。 估，最后讨论达成共识。所有卵巢乳头状癌患者临床分 本实验利用QT-PCR 法、免疫组织化学染色法、 期按国际妇产科联盟（FIGO ，1988 年）标准，其中I-II Western blot 法检测VEGF/MMP-2 基因及蛋白在正常卵 期 15 例，III-IV 期 65 例。 巢组织、卵巢乳头状癌组织中的表达情况，探讨其与卵 1.2.2　总RNA 提取，检测VEGF/MMP-2 基因水平的 巢乳头状癌侵袭、转移的关系，为