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聚凝胺法与达亚美卡式方法的比较
聚凝胺法的优缺点
聚凝胺法是目前国内医院输血科应用比较多的一种方法。该方法所需试验时间少(3~5分钟)、方法灵敏度高IgG分子不能检出。
由于反应温度为室温,因此无法排除无临床意义抗体的干扰(尤其是室温盐水反应性抗体)。
达亚美卡式方法的原理和优势
原理:
达亚美卡由数根特殊的微管组成,微管内含有葡聚糖凝胶介质。该方法的技术基础是利用了凝胶将红细胞从人血中分离出来的过滤原理。通过调节凝胶间隙的大小,使其间隙只能允许游离的红细胞通过,而聚集红细胞不能通过,从而使游离红细胞与聚集红细胞分离。如果通过离心,红细胞沉积在凝胶管底部,则表明红细胞未发生凝聚,是阴性反应;若红细胞聚集在凝胶管上部,则表明红细胞发生凝集,呈阳性反应。该技术的目的是使红细胞凝集反应标准化,并通过固定凝集块,使反应的判读更加简便、可靠。
优势:
1. 测试结果安全可靠: 选择已知弱的或变异红细胞样本来估价凝胶血型卡,发现用传统方法检测不到的抗原-抗体反应,用凝胶微柱可清晰地显示出来。
2. 精确性非常高 1).凝胶间隙很小,可检测到微弱的红细胞凝集。 2).凝胶中加入抗人球蛋白、单克隆及多克隆抗体等,可以检测出不完全抗体和弱化抗原。
3. 凝胶抗人球测试不需要洗涤红细胞:
红细胞的密度远大于血清中的游离抗体,当离心时,红细胞的沉降速率远大于游离抗体,故红细胞首先和凝胶中的抗人球蛋白反应,而不受血清中游离抗体的干扰,从而可免除洗涤这一步骤.
4. 结果判断客观性强、准确性高:
阴性、阳性、弱阳性的结果判断都有明确的界定,不依操作者与实验室的不同而变化。大多数传统测试法仍然依赖于对液体环境下凝集反应的解释,由于缺乏客观性的反应终点,反应结果的判读准确性因人而易。即使自动化判读机也很难将微弱的血细胞凝集与阴性反应区别开来。
5. 凝集反应稳定性好: 可在几小时后判读结果,并且可将凝胶卡保留放置5-7天。而传统方法需要在几分钟内判读结果。
达亚美卡式方法的应用
ABO血型正反定型、Rh血型定型、不完全抗体筛查与鉴定等
对临床的指导意义
1)妇科:监测孕妇血清中IgG抗体的水平(抗体滴度),预防新生儿溶血病的发生。
2)儿科:新生儿溶血性疾病的诊断即新生儿三项试验:直接抗人球蛋白试验 、游离试验 、放散试验。如果有一项为阳性,则诊断为新生儿溶血病。
对于两抗原结合位点结合在同一红细胞上的IgG分子,即便是聚凝胺法能使红细胞之间的距离拉的很近,但两个红细胞仍无法结合在一起。因为IgG分子的两个抗原结合位点都被占据了,不能再连接其他红细胞
只有这类仅有一个抗原结合位点结合在一个红细胞上的IgG分子才能被聚凝胺法检出。即IgG的另一个抗原结合位点可与其他红细胞结合,从而使两个红细胞凝集在一起。
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