有机磷水解酶基因OPD转化番茄、黄瓜降解农药残留的研究.pdfVIP

项 目 资 助 项 目 资 助 项项 目目 资资 助助 国家科技支撑计划项目 项目名称：喀斯特山区特有作物优异基因资源发掘与转基因安 全关键技术研究及应用 项目编号：2007BAD59B00 科技部国际科技合作项目 项目名称：基因删除技术在转基因水稻和油菜上的应用及安全 性评价 项目编号：2007DFA31260 贵州茅台科技联合基金项目 项目名称： 茅台酒原料基地建设关键技术研究及应用 项目编号： 黔科合茅科联字[2008]7001 有机磷水解酶基因 OPD转化番茄、黄瓜降解农药残留的研究 目 录 缩略词列表i 中文摘要1 Abstract 3 第一章 文献综述6 1.1 农药残留现状 6 1.1.1 水土农药残留 6 1.1.2 果蔬农药残留 7 1.1.3 中药材农药残留 9 1.1.4 茶叶农药残留 10 1.1.5 烟草农药残留 10 1.1.6 农药残留对人类的危害 11 1.2 农药残留降解资源 12 1.2.1 农药降解微生物 13 1.2.2 真菌降解酶 15 1.2.3 细菌降解酶和降解基因 16 1.3 有机磷农药水解酶 OPH 的研究进展 19 1.3.1 OPH 酶促降解机理 20 1.3.2 OPH 的重组表达和定向改造 23 1.3.3 OPH 在监测环境农残上的应用 25 1.3.4 展望 26 1.4 农药残留的植物修复 27 1.4.1 植物直接吸收并降解农药 27 1.4.2 植物根际与微生物的协同降解 29 1.4.3 植物修复技术的展望 30 1.5 立题思路31 第二章 有机磷水解酶基因 OPD转化番茄、黄瓜降解农药残留的研究 33 第一节 表达载体构建与番茄瞬时表达研究 34 2.1.1 材料与方法 34 材料 34 方法 36 2.1.2 结果与分析 41 I 有机磷水解酶基因 OPD转化番茄、黄瓜降解农药残留的研究 E8 启动子的克隆41 OPD表达载体的构建 41 瞬时转化番茄的 GUS 染色 43 瞬时表达 OPH 酶活分析 43 瞬时转化番茄的 RT-PCR 检测 45 2.1.3 讨论45 第二节 转基因番茄、黄瓜表达 OPH 研究 47 2.2.1 材料与方法 47 材料 47 方法 47 2.2.2 结果与分析 53 黄瓜再生体系 53 转基因黄瓜 GUS 染色与 PCR 检测53 转基因黄瓜 OPH 酶活分析 54 番茄