拉伸应变对破骨细胞凋亡的影响及其作用机制的研究.pdfVIP

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2017-06-15 发布于上海
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拉伸应变对破骨细胞凋亡的影响及其作用机制的研究.pdf

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拉伸应变对破骨细胞凋亡的影响及其作用机制的研究论文

目录摘要 IX AbstractXII 第 1 章：绪论 1 1.1 研究背景 1 1.2 研究的目的和意义 3 1.3 研究内容与研究方法 4 第 2 章：破骨细胞的培养及鉴定 6 2.1 引言 6 2.2 材料与方法 6 2.2.1 细胞 6 2.2.2 主要试剂 6 2.2.3 主要仪器 7 2.2.4 实验试剂的配制 7 2.2.5 实验方法 8 2.2.5.1 RAW264.7 细胞的培养 8 2.2.5.2 破骨细胞的诱导培养方法 8 2.2.5.3 抗酒石酸酸性磷酸酶染色 8 2.2.5.4 骨片骨吸收陷窝甲苯胺蓝染色和扫描电子显微镜检测 8 2.3 实验结果 9 2.3.1 诱导形成的破骨细胞形态学观察 9 2.3.2 抗酒石酸酸性磷酸酶染色结果 10 2.3.3 骨片骨吸收陷窝甲苯胺蓝染色结果 10 2.3.4 骨片骨吸收陷窝扫描电子显微镜检测结果 11 I 2.4 讨论 11 2.5 结论 13 第 3 章：拉伸应变对破骨细胞凋亡的影响 14 3.1 引言 14 3.2 材料与方法 14 3.2.1 细胞 14 3.2.2 主要试剂 14 3.2.3 主要仪器 15 3.2.4 基底拉伸应变加载装置 15 3.2.5 实验试剂的配制 16 3.2.6 实验方法 17 3.2.6.1 RAW264.7 细胞的培养及破骨细胞的诱导 17 3.2.6.2 破骨细胞不同强度的力学加载 17 3.2.6.3 hoechst33258 染色 17 3.2.6.4 Annexin V/PI 染色，流式细胞仪检测细胞凋亡 17 3.2.6.5 caspase-3 活性检测 17 3.2.6.6 统计学处理 18 3.3 实验结果 18 3.3.1 hoechst 染色 18 3.3.2 Annexin V/PI 染色，流式细胞仪检测细胞凋亡的影响 19 3.3.3 caspase-3 活性的变化 20 3.4 讨论 20 3.5 结论 23 第 4 章：拉伸应变对破骨细胞凋亡影响的机制研究 24 4.1 引言 24 II 4.2 材料与方法 24 4.2.1 细胞 24 4.2.2 主要试剂 24 4.2.3 主要仪器 25 4.2.4 实验试剂的配制 26 4.2.5 实验方法 26 4.2.5.1 RAW264.7 细胞的培养及破骨细胞的诱导 26 4.2.5.2 破骨细胞不同强度的力学加载 26 4.2.5.3 线粒体膜电位测量 27