短帚霉的形态学观察及其体内药物敏感性实验研究.pdfVIP

目 录· 中文摘要…………………………………………………………………1 英文摘要…………………………………………………………………5 研究论文短帚霉的形态学观察及其体内药物敏感性实验研究 ． 前言…………………………………………………………………99日U吾………………………………………………………………… 材料与方法…………………………………………………………9 结果…………………………………………………………………14 附图…………………………………………………………………19 附表…………………………………………………………………30 讨论…………………………………………………………………34 结论…………………………………………………………………38 参考文献……………………………………………………………38 综述抗真菌药物的体外药敏实验研究进展．．：………………………40 致谢………………………………………………………………………52 个人简历…………………………………………………………………53 中文摘要 短帚霉的形态学观察及其体内药物敏感性实验研究 摘 要 目的：短帚霉(Scopulariopsisbrevicaulis)是一种腐生性条件致病真菌， 通常引起甲真菌病，较少引起其他部位的感染，但目前国外已经有关于深 部组织感染的报道。此菌分离于我科门诊病人，经中国医学科学院微生物 brevicaulis。 研究所鉴定为Scopulariopsis 本研究一方面通过对短帚霉在四种不同培养基上的培养情况进行观 察，以便寻找出适合其生长的培养基及温度；另一方面，应用氟康唑、伊 曲康唑和特比萘芬三种常用抗真菌药物治疗小鼠的短帚霉系统感染，通过 对试验小鼠生存率以及心、肝、脾、肺组织的真菌逆培养阳性率和肾脏组 织载菌量的检测来评价它们在小鼠体内抗短帚霉的活性，为临床上治疗短 帚霉系统感染提供实验室依据；并通过组织病理学检查，为进一步了解此 菌引起小鼠的病理形态学改变提供实验室依据。 方法： l形态学观察试验 1．1大体形态 取我科保存菌种常温下复苏，3天后转种于沙堡氏琼脂培养基 分别置37℃和27℃温箱培养2周，每日测量并记录菌落直径，观察菌 落形态。 1．2平皿培养的光镜下观察每日分别挑取37℃和27℃的四种培养基的 菌落标本置于载玻片上，经乳酸酚棉蓝染色，光镜下观察。 2生理学实验 2．1尿素酶试验将菌落接种于尿素琼脂培养基上，室温培养l周，观察 培养基变色情况。 3体内药敏试验 3．1短帚霉系统感染动物模型的制作： 取我科保存菌种复苏转种，用无菌生理盐水制备成菌悬液，通过腹腔 注射途径接种至应用环磷酰胺免疫抑制的小鼠体内，每只小鼠腹腔注射菌 中文摘要 悬液为0．5ml。 3．2生存观察 腹腔注射，每天1次，连续5天。连续观察各组小鼠接种后的一般状况 及小鼠接种后2l天内的自然死亡情况，记录死亡日期和每天的死亡只 数。 3．3组织逆培养 接种真菌悬液后的第6天各组分别处死组织载菌量部分小鼠，取出 心、肝、脾、肺分别置于组织研磨器中，研碎后取少许组织分3点接种于 改良沙堡氏固体培养基，置于27℃恒温箱中培养。 3．4。肾脏组织载菌量(CFU)的测定 分别取氟康唑组、伊曲康唑组、特比萘芬组和对照组中的15只小鼠， 每组的15只小鼠各取一侧的肾脏，组织研磨器研碎后，用无菌生理盐水 稀释至lml，取lO微升组织悬液均匀涂布于平皿培养基表面，27℃恒温箱 培养，48h后读取菌落数。 3．5组织病理学检查 取各脏器表面肉眼可见病理改变组织，用10％福尔马林溶液常温固 定，常规脱水、透明、包埋、切片，HE和PAS染色，光镜下观察组织病 理学变化。 结果： l形态学观察试验 1．1绘制的生长曲线 在SDA和PDA两种培养基上，短帚霉于培养的第1周生长较快， 其生长速度与时间呈正比；在两种温度下，27℃较37。C生长快。在米饭 培养基和吐温80两种培养基上生长速度始终较慢，27℃较37。C生长稍 快