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表达载体pHAT2图谱及序列信息
EMBL Protein Expression and Purification Facility
pHAT2 - His-tagged expression vector
Features position
T7 promoter 1-17
Lac operator 21-42
T7 gene 10 ribosome binding site 50-80
His-tag 92-109
Polylinker 111-179
SP6 promoter 184-202
T7 transcription terminator 281-322
LacI gene 732-1813 (reversed)
-Lactamase gene 2583-3433
Origin of replication 3507-4203
Reference:
Peränen J., Rikkonen M.,Hyvönen M. Kääriäinen L. (1996) T7 vectors with modified T7lac promoter for
expression of proteins in Escherichia coli . Anal. Biochem. 236 , 371-373.
pHAT2
T7 promoter -- Lac operator XbaI
ATTAATACGACTCACTATAGGGAATTGTGAGCGGATAACAATTCCTCTAGAAATAATTTT
TAATTATGCTGAGTGATATCCCTTAACACTCGCCTATTGTTAAGGAGATCTTTATTAAAA
rbs His-tag NcoI
GTTTAACTTTAAGAAGGAGATATATCCATGAGTCATCACCATCACCATCACTCCATGGAT
CAAATTGAAATTCTTCCTCTATATAGGTACTCAGTAGTGGTAGTGGTAGTGAGGTACCTA
METSerHisHisHsiHisHisHisSerMetAsp
EcoRI SalI XhoI BamHI NotI NsiI HindIII
ATCGAATTCGTCGACCTCGAGGGATCCGGGCCCTCTAGATGCGGCCGCATGCATAAGCTT
TAGCTTAAGCAGCTGGAGCTCCCTAGGCCCGGGAGATCTACGCCGGCGTACGTATTCGAA
IleGluPheValAspLeuGluGlySerGlyProSerArgCysGlyArgMetHisLysLeu
-- SP6 promoter
GAGTATTCTATAGTGTCACCTAAATCCCAGCTTGATCCGGCTGCTAACAAAGCCCGAAAG
CTCATAAGATATCACAGTGGATTTAGGGTCGAACTAGGCCGACGATTGTTTCGGGCTTTC
GluTyrSerIleValSerProLysSerGlnLeuAspProAlaAlaAsnLysAlaArgLys
Single Cut
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