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第六章 微生物的遗传和变异-环境工程微生物
一、质粒育种 将两种或多种微生物通过细胞结合或融合技术,使供体菌的质粒转移到受体菌体内,使受体菌保留自身功能质粒,同时获得供体菌的功能质粒,培养出具有两种功能质粒的新品种。 多功能超级细菌的构建 解烷抗汞质粒菌的构建 脱色工程菌的构建 Q5T工程菌 二、基因工程技术在环境保护中的作用 指在基因水平上的遗传工程,又叫基因剪接或DNA体外重组。 1、目的基因的获得 2、DNA体外重组 3、将重组体转入受体细胞 4、重组体克隆的筛选和鉴定 5、外源基因表达产物的分离与提纯 第六章 微生物的遗传和变异 微生物的遗传 微生物的变异 基因重组 遗传工程技术在环境保护中的应用 遗传和变异是一切生物最本质的属性。 遗传:生物繁殖与自已相同或相似的后代的现象 变异:生物亲代与子代之间,子代个体之间有差异的现象,主要体现在形态和生理性状。 遗传是相对的,变异是绝对的;遗传中有变异,变异中有遗传。 驯化是选育优良微生物品种的普通而有效的方法和途径。 第一节 微生物的遗传 通过2个经典实验证明了DNA是遗传物质基础。 1.肺炎链球菌的转化现象 2.T4噬菌体感染实验 一、遗传和变异的物质基础-DNA 噬菌体 用放射性硫跟踪蛋白质表层 用放射性磷跟踪核心的DNA 侵染 搅拌 分离 细胞中无硫 外表有硫 细胞中有磷 外表无磷 2、噬菌体感染实验 二、DNA的结构与复制 (一)DNA结构 。 基本特点: (1) DNA由两互相平行的脱氧核苷酸长链盘绕而成 (2)脱氧核苷酸和磷酸交替连接,构成基本骨架,碱基排列在内侧 (3)碱基以氢键相结合形成碱基对 双螺旋结构 三股螺旋DNA 1、DNA的存在形式 真核生物:染色体(DNA+组蛋白),丝状结构,所有染色体由核膜包成一个细胞核 原核生物:DNA细丝构成环状的染色体,核区 2、基因: 一切生物体内储存信息的,有自我复制能力的遗传功能单位。 结构基因 操纵基因 调节基因 DNA 复制 RNA 转录 蛋白质 翻译 逆转录 复制 中心法则: DNA的复制和遗传信息传递的基本规则 生物的遗传信息从DNA传递给mRNA的过程称为转录。根据mRNA链上的遗传信息合成蛋白质的过程,被称为翻译和表达。 翻译和肽链折叠 组装 转录 DNA mRNA 从 基 因 到 蛋 白 的 转 录 和 翻 译 过 程 3、遗传信息的传递 ( 二)DNA的复制——半保留复制 三、DNA的变性和复性 (一)DNA变性 DNA的双螺旋由氢键维持,当天然双螺旋DNA受热或其他因素作用下,两条链之间的结合力被破坏而分开成为单链DNA。 解链温度Tm: (二)DNA的复性 定义: 复性的双链DNA是随机结合的。 由DNA复性研究发展的技术是分子杂交 四、RNA 以核糖代替脱氧核糖,以尿嘧啶(U)代替胸腺嘧啶(T)。 mRNA:信使RNA,带有指导氨基酸的信息密码,传递遗传性状 tRNA:转移RNA,识别氨基酸及识别mRNA 上的密码子 反义RNA:与DNA的碱基互补,能阻止、干扰复制、转录和翻译短小的RNA。 rRNA :核糖体RNA,与蛋白质共同组成核糖体,是合成蛋白质的场所。 五、遗传密码 存在于mRNA上,由相邻的3个核苷酸组成,代表一个氨基酸的核苷酸序列,即三联密码子, 64组密码子: 61组分别代表20种氨基酸编码—有意义密码子 起始密码子 无意义密码子(3组) 五、微生物生长和蛋白质合成 微生物生长的主要活动是蛋白质的合成,蛋白质的合成在核糖体上进行,RNA的合成速率是控制生长速率的关键因素。 蛋白质合成的过程: (1)DNA复制 (2)DNA转录:RNA合成 (3)tRNA翻译 (4)蛋白质合成 六、微生物的细胞分裂 由于DNA复制和蛋白质合成,两者增加,最后导致微生物细胞的分裂。 第二节 微生物的变异 一、变异的实质——基因突变 由于某种因素的影响,DNA上的碱基对发生差错,出现碱基的缺失、置换或插入,改变了基因内原有的碱基顺序,导致后代性状的改变。 二、突变的类型 (一)自发突变: 指微生物在自然条件下,没有人工参与而发生的基因突变 1、多因素低剂量的诱变效应 2、互变异构效应 (二)诱发突变 物理诱变,如紫外线。 化学诱变,利用化学物质促进突变。 复合处理及其协同效应 定向培育和驯化 人为用某一特定环境条件长期处理某一微生物群体,同时将它们进行移种传代,以达到累积和选择合适的自发突变体的一种育种方法。 在环境工程中,常采用定向培育的方法来培育菌种(驯化)。 第三节 基因重组 基因重组:两个不同性状个体细胞的DNA融合,使基因重新组合,从而发生遗传变异,产
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