32体外受精和早期胚胎培养整理.pptVIP

§3－2体外受精和早期胚胎培养 试管动物技术 通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经过移植产生后代的技术 过程 试管动物 与 克隆动物 生殖方式：有性生殖 无性生殖 技术手段： 遗传规律：遵循 无 体外受精、胚胎移植 核移植技术、胚胎移植 一、体外受精 1、卵母细胞的采集和培养 2、精子的采集和获能 3、受精 1、卵母细胞的采集和培养 实验动物小鼠、兔、猪、羊，如何排出更多的卵子? 促性腺激素处理，排出更多的卵细胞，然后，从输卵管中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精 对于大家畜或大型动物如何采集卵子? 屠宰场母畜的卵巢中采集 从活体动物的卵巢中吸取（超声波探测仪、内窥镜或腹腔镜）----活体采卵 1、卵母细胞的采集和培养 采集的卵子是否马上可以受精 在体外人工培养成熟后（MII中期），才能与获能的精子受精 活体采卵的意义 充分发挥优良母畜的繁殖潜力 2、精子的采集和获能 采集方法 2、精子的采集和获能 精子获能方法 培养法（获能液） 将取自附睾的精子，放入人工配制的培养液中 啮齿动物、家兔、猪 化学法 在一定浓度的肝素或钙离子载体A23187中用化学药物诱导精子获能 牛、羊 3、受精 获能的精子＋成熟的卵子（MII） 二、胚胎早期培养 精子与卵细胞在体外受精后，应将受精卵移入发育培养液中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力。 培养发育到适宜阶段时，可将其取出向受体移植或冷动保存 动物胚胎培养液成分 无机盐和有机盐，还需添加维生素，激素，氨基酸，核苷酸等营养成分，以及动物血清 动物胚胎移植时间 牛、羊：桑椹胚阶段或囊胚阶段 小鼠、家兔：可在更早阶段 人：试管胚胎可在8~16个细胞阶段移植 * 大侠 移植 受精卵 早期 胚胎 子宫 精子 卵子 个体 1.卵母细胞的收集和培养 对不同动物,采取卵母细胞的方法不同 假阴道法 手握法 电刺激法 （仿生学）模拟发情期雌性动物阴道环境设计的装置，（压力、温度和润滑度；活台畜、假台畜） 精子的获能处理 猪、犬等体型小、易于控制的动物 刺激腰荐部的射精中枢神经，野生或经济动物 3.受精 在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程 或受精液 胚胎 发育培养液 获能液 受精卵 * 大侠