CE法测定CD45-FITC荧光抗体溶液中的游离FITC.pdfVIP

第27卷第 11期 化 学 研 究 与 应 用 Vo1．27．No．11 2015年 11月 ChemicalResearchandApplication Nov．，2015 文章编号：1004—1656(2015)11—1666-05 CE法测定 CD45一FITC荧光抗体溶液中的游离 FITC 薛洪宝 ，张 晖 ，李柏青 ，梁丽丽 ，陶兆林 (1．蚌埠医学院化学教研室，安徽 蚌埠 233030； 2．蚌埠医学院感染与免疫安徽省重点实验室，安徽 蚌埠 233030) 摘要：建立了测定CD45一FITC荧光抗体样品溶液中游离FITC浓度的毛细管电泳(CE)方法。熔融石英毛细管 45cm(有效长度 30em)x75 mi．d．；0．05mol·L 磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液 (含5g·L～PEG4000，pH= 7．14)；分离电压+l2kV；进样压力0．5psi(3．45kPa)，进样时间3．0S；分离温度25℃；UV—Vis检测器检测波 长200nm。该方法能有效测定CD45一FITC荧光抗体样品溶液中游离的FITC含量，线性回归方程相关系数r= 0．9900，检测限LOQ=0．20tzgm·L。。。样品加标回收率为 105．49％，相对标准偏差小于5．36％。该方法快速、 灵敏、重现性好，能用于CIM5一FITC荧光抗体样品溶液中游离FITC的快速测定。 关键词 ：毛细管电泳法 (CE)；CD45一FITC荧光抗体 ；游离 FITC 中图分类号：0657．8 文献标志码 ：A Determination offreefluorescein isothiocyanatein CD45一FITC fluorescentantibodyby、capillaryelectr0ph0resis XUEHong．bao ，ZHANGHui ，LIBai—qing ，LIANG Li．1i，TAO Zhao．1in (1．DepartmentofChemistry，BengbuMedicalCollege，Bengbu233030，China； 2．AnhuiKeyLaboratoryofInfectionandImmunity，BengbuMedicalCollege，Bengbu233030，China) Abstract：Arapidcapillary electrophoresis(CE)methodwasdevelopedforthedeterminationoffreefluoresceinisothiocyanate (FITC)inCD45一FITCfluorescentantibodysolution．TheanalyseswerecarriedoutonaCEsystemequippedwithanUV—Visdetector andaPDAdetector．Separationwasperformedinabarefused—silicacapillary of45．0cm long(30．0em tothedetector，75txm i．d．)at25℃ ，anda0．05mol·L～disodiumhydrogenphosphate—sodiumdihydrogenphosphatebuffersolution(containing5g·I PEG4000，pH：7．14)wasusedasbackgroundelectrolyte．Thesampleswereintroducedintothecapillaryunderapressureof0．5 psi(3．45kPa)ofr3S，andtheseparationvoltagewassetat+l2kV．Thedetectionwavelengthwasfixedat200nm．Inthisap— proach，FITC couldbedeterminedinCIM5一FITCfluorescentan