兔皮肤真菌病病原PCR快速诊断技术研究.pdfVIP

10 ChineseJournalofRabbitFarming 1/2017 试验研究试验研究 兔皮肤真菌病病原兔皮肤真菌病病原PCRPCR快速诊断技术研究快速诊断技术研究 韦韦 强强，，肖琛闻肖琛闻，，季权安季权安，，刘燕刘燕，，潘丽俊潘丽俊，，李科李科，，鲍国连鲍国连＊＊ （浙江省农业科学院畜牧兽医研究所，杭州 310021） 摘 要：兔皮肤真菌病近年来在我国各地流行严重，其病原菌靠传统的表型特征鉴定难以区分，本文从 浙江、江苏等各地发病的21个兔场各品种兔中通过培养分离纯化出17株真菌，在培养特性等表型特征 初步鉴定的基础上，进一步建立了PCR快速诊断技术，通过基因扩增和序列测定，能够正确作出鉴别诊 断，分别鉴定出须癣毛癣菌10株、犬小孢子菌5株和趾间毛癣菌2株，其扩增的基因片段大小分别为 692bp、741bp和708bp。 关键词：兔皮肤真菌病；真菌；PCR；诊断 中图分类号：S829.1 文献标识码：A 文章编号：1005-6237（2017）01-0010-04 StudyofRapidPCRDiagnosticTechniquesofinRabbitDermatosis WEIQiang，XIAOChen-wen，JIQuan-an，LIUYan，PANLi-jun，LIKe，BAOGuo-lian* （ZhejiangAcademyofAgriculturalSciencesAnimalHusbandryandVeterinaryResearchInstitute，Hangzhou310021） Abstract：Rabbitdermatosiswasseriouslyhappenedalloverthecountry,howeverthepathogenbytraditional phenotypiccharacterizationwasdifficulttodistinguishwitheachother.Seventeenstrainsoffungiwereisolated from21warrensinZhejiang,Jiangsuandotherplaces.ArapidPCRdiagnosistechniquewasestablishedbased ontheculturephenotypiccharacteristics.Furthermore,differentialdiagnosiswereidentifiedthroughgeneam⁃ plificationandsequencedetermination,andcouldidentify 10strainsofTrichophyton,5strainsofMicrosporum canisand2strainsoftoeTrichophytonrubrum.Theamplifiedgenefragmentsizewere692bp,741bpand708bp respectively. Keywords:Rabbitdermatosis；Fungi；PCR；Diagnosis 近年来在全国各地流行的兔皮肤真菌病是我国当 气中，病原复杂，到底是单一的病原真菌还是多病原感 [2-3] 前危害养兔业最为严重的皮肤病，发病率可达30%～ 染，因此需要一种能及时快速作出诊断的方法 ，为 95％，发病死亡率可达10%～30％，各地兔场均有发 此笔者根据分离的病原真菌，在培养特性等表型方面 [1] 生，各品种兔均会发病 ，兔场一旦感染，由于该病的顽 作出初步鉴定的基础上，设计了引物，进一步建立了 固性，能很快传遍整个兔场，严重影响其生长性能及皮 PCR快速诊断技术，能够快速、正确地作出诊断，为该 毛的质量，从而影响养殖者的经济效益。为此，很多学