高中生物常用试剂.docVIP

PAGE PAGE 1 高中生物实验方法与常用试剂 1．实验方法??实验方法是整个实验设计的精髓，是做好实验设计的关键所在。现将与中学实验有关的一些最常见的经典的实验方法汇总如下：　(1)化学物质的检测方法：①淀粉——碘液②还原糖——斐林试剂、班氏试剂③CO2——Ca(OH)2溶液或酸碱指示剂④乳酸——pH试纸⑤O2——余烬复燃⑥无O2——火焰熄灭⑦蛋白质——双缩脲试剂⑧染色体——龙胆紫、醋酸洋红溶液⑨DNA——二苯胺试剂⑩脂肪——苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液　(2)实验结果的显示方法：①光合速率——O2释放量或CO2吸收量或淀粉产生量②呼吸速率——O2吸收量或CO2释放量或淀粉减少量③原子途径——放射性同位素示踪法④细胞液浓度大小——质壁分离⑤细胞是否死亡——质壁分离⑥甲状腺激素作用——动物耗氧量，发育速度等⑦生长激素作用——生长速度(体重变化，身高变化)⑧胰岛素作用——动物活动状态⑨菌量——菌落数或亚甲基蓝溶液褪色程度⑩大肠杆菌——伊红—美蓝琼脂培养基　(3)实验条件的控制方法：①增加水中氧气——泵入空气或吹气或放入绿色植物②减少水中氧气——容器密封或油膜覆盖或用凉开水③除去容器中CO2——NaOH溶液④除去叶片中原有淀粉——置于黑暗环境⑤除去叶片中叶绿素——酒精隔水加热⑥除去光合作用对呼吸作用的干扰——给植株遮光⑦如何得到单色光——棱镜色散或彩色薄膜滤光⑧血液抗凝——加入柠檬酸钠⑨线粒体提取——细胞匀浆离心⑩骨的脱钙——盐酸溶液⑩灭菌方法——微生物培养的关键在于灭菌，对不同材料,灭菌方法不同：培养基用高压蒸气灭菌；接种环用火焰灼烧灭菌；双手用肥皂洗净，擦干后用75％酒精消毒；整个接种过程都在实验室无菌区进行。　　(4)实验中控制温度的方法：①还原糖鉴定：水浴煮沸加热②酶促反应：水浴保温③用酒精溶解叶中的叶绿素：酒精要隔水加热④DNA的鉴定：水浴煮沸加热⑤细胞和组织培养以及微生物培养：恒温培养2．斐林试剂、班氏试剂与尿糖试纸　　这三种物质均可用来检验含醛基的有机物的存在，在医学上用来检验糖尿病，其原理均是利用了Cu2+的氧化性把醛基氧化，但成分略有不同：　斐林试剂：即硫酸铜、氢氧化钠和酒石酸钾钠组成的蓝色混合溶液。分为斐林试剂A和斐林试剂B，A为CuSO4溶液，B为氢氧化钠和酒石酸钾钠的混合溶液，使用时将A、B等体积混合即成斐林试剂。　班氏试剂：即硫酸铜、碳酸钠和柠檬酸钠组成的混合液，又叫本尼迪克特(Benedict)试剂，它与醛反应的结果是与斐林试剂一致的，只是比斐林试剂更稳定，所以在临床化验中更常使用。　尿糖试纸：又叫硫酸铜试纸，呈白色,带蓝色斑点，用于糖尿病患者的尿糖测试。每片含硫酸铜20毫克,枸橼酸300毫克,碳酸钠80毫克，氢氧化钠235毫克。尿糖试纸法快速、方便，试纸的正确使用方法为：将试纸条放在尿液中浸湿，一秒钟后取出，在一分钟内观察试纸的颜色，并与标准色板对照，根据不同的颜色来确定尿糖阳性的程度。3．斐林试剂和双缩脲试剂的比较　相同点：①都由NaOH溶液和CuSO4溶液构成；　　　　　②斐林试剂甲液和双缩脲试剂A都为0．1g/mLNaOH溶液。　不同点：①CuSO4溶液浓度不一样：斐林试剂乙液为0．05g/mLCuSO4溶液，双缩脲试剂B为0．01g/mLCuSO4溶液。　　　　　②配制比例不一样。　　　　　③使用方法不一样：斐林试剂是甲、乙液一起混合后再使用，双缩脲试剂则是先向待鉴定材料加入A试剂摇匀后，再加入试剂B。　　　　　④鉴定的对象不一样：斐林试剂鉴定的是还原糖，双缩脲试剂鉴定的是蛋白质。　　　　　⑤反应本质及颜色反应不一样。4．苏丹Ⅲ染液与苏丹Ⅳ染液的比较　　都是用来鉴定脂肪。苏丹Ⅳ染液更易溶于脂肪，所以染色更深，同时要求染色时间更短。生物学中常用的试剂：?1、斐林试剂：?成分：0.1g/ml?NaOH（甲液）和0.05g/ml?CuSO4（乙液）。用法：将斐林试剂甲液和乙液等体积混合，再将混合后的斐林试剂倒入待测液，水浴加热或直接加热，如待测液中存在还原糖，则呈砖红色。?2、班氏糖定性试剂：为蓝色溶液。和葡萄糖混合后沸水浴会出现砖红色沉淀。用于尿糖的测定。?3、双缩脲试剂：成分：0.1g/ml?NaOH（甲液）和0.01g/ml?CuSO4（乙液）。用法：向待测液中先加入2ml甲液，摇匀，再向其中加入3~4滴乙液，摇匀。如待测中存在蛋白质，则呈现紫色。?4、苏丹Ⅲ：用法：取苏丹Ⅲ颗粒溶于95%的酒精中，摇匀。用于检测脂肪。可将脂肪染成橘黄色（被苏丹Ⅳ染成红色）。?5、二苯胺：用于鉴定DNA。DNA遇二苯胺（沸水浴）会被染成蓝色。?6、甲基绿：用于鉴定DNA。DNA遇甲基绿（