大鼠不同脑区突触体钙水平的年龄差异.pdfVIP

维普资讯 ；7，一 77 I(1) 动 物 学 研 究 1995，16 (4)：373—377 CN 53—1040／Q ISSN 0254—5853 ZoologicalResearch 大鼠不同脑区突触体钙水平的年龄差异 ． 王 良斌 张维宅／邵 悦 杜红燕 王金唏一 吴馥梅 献牲 铀 系 恻’ 甲 ‘歹_-／7 ^ | f o ／ ^ ，1 摘要 本实验使用荧光指示剂Fura2与Tb抖，检测了不同年龄组大鼠的不同脑 (海 马、皮层、问脑、小脑)突触体 内游离钙与膜结合钙水平。结果显示，与青年对照组相比，老 年大鼠大部分脑区 (海马、皮层、间脑)窘触体内游离钙水平显著增高，尤其是海马突触体内 游离钙增高极为显著；其突触体膜结合钙水平表现为：海马、小脑两脑 区明显升高，而皮层、 问脑两脑区明显下降，呈现一种垒脑范围内的钙水平失衡。提示动物的衰老 与其脑 内钙 自体平 衡失调有关。 关键词 年龄．．查璺土窭厂攀丝堡，Caz+。 细胞内钙离子(Ca“)水乎的变化在细胞各种机能活动中起开关式作用，是细胞生理功 能的重要物质基础，其微小变化可引起一系列生理性乃至病理性改变 。生物体衰老过程 中 伴有 Ca 自体平衡失调，对老化和早老性痴呆病人的研究(Landfield，1989)发现，在含 有神经纤维缠结的脑细胞和来源 于早老性痴呆病人的成纤维细胞 内均见到钙的堆积，引起 钙内流增加的主要原因是脑细胞内钙缓冲、钙外排或重摄取机制的改变。有研究指出，细 胞内钙浓度过高或钙超负荷会使钙依赖性生理生化反应超常运转，耗竭 ATP，产生 自由 基，直至引起细胞死亡 (Blausten，198s)。 突触(synapses)是神经信息传递的关键部位，参与各种神经细胞的生理、病理活动。 突触体(synaptosome)保留着原位突触的机能特性，象一般细胞一样，有完整的膜，内含 各种细胞器和胞浆 。突触膜上有离子通道，仍具有生理活性，对突触俸 内外 ca 的平衡 起调节作用，类似于完整的括细胞(Whittaker，1972)。因此，突触体是在离体条件下探 讨神经系统生理或病理机制常用的实验材料。本实验是在过去工作的基础上，对不同年龄 大鼠不同脑区突触体 内游离钙和膜结合钙水乎周时进行了对应观测，以探讨动物在 自然衰 老过程 中不同脑区突触体钙水乎的变化规律。 1 材料与方法 1．1 突触体 内 [Ca ) 的测定 1．1．1 突触俸的制备 实验动物采用 SD雄性大白鼠，分青年组(3月龄)和老年组 (26月 ·江苏省科学技术委墒资助项 目 ·南京大学配位化学国家重点实验室 奉文 1994年 l0月7日收到，1995年 3月 27日捶回 维普资讯 374 物 学 研 究 l6君 龄)。突触体的分离根据 Hajos的方法 (1975)，并略有改进。分离大鼠的皮层、海马、间 脑 及 小脑 ，将 组 织称 重 ，加 入 9倍体 积 (1g／9m1)的 0．32mol／L蔗 糖溶 液 (含 10 mmol／L 葡 萄 糖 ，pH7．4)，用 Teflon 玻 璃 匀 浆 器 进 行 匀 浆 ， l0次 上 下 ， 850r／min，所有操作均在 o__4℃进行 。匀浆液 1500r／rain离心 10rain，上清液再于 9500r／min离心 20rain，得到 P^组分。 将 组分用 O．32otol／L蔗糖液(1g温脑重 ／1ml蔗糖液)缓慢再