分光光度计 氘灯更换说明.pdfVIP

（一）前言： 众所周知，紫外可见分光光度计的光源部需要经常更换光源灯（钨灯或氘灯），一般来说这 种工作均由仪器厂家的工程师来进行；如果仪器用户自己可以掌握这种更换和调整技术，既 能节约等待时间又能节省维修费用，可谓一举两得。虽然有些用户也曾经自行尝试过这种工 作，但往往效果不太理想，究其原因则是没有掌握要领，他们将这种更换光源灯的工作看做 与更换室内照明灯泡的性质一样，认为只要换上的光源灯被亮即万事大吉；为此、我以日立 U-3010 型分光光度计为例，谈谈这方面的调整要领。 （二）光源灯室的构造： （1）简易型的仪器 一般简易型分光光度计的光源室仅仅设计了一支钨灯来涵盖整个波长区域的使用，由于 钨灯的能量在紫外区很弱，因此、此类仪器在紫外区的测量信号的噪声较大。 当然、也有专用的紫外分光光度计 （如液相检测器或核酸蛋白仪等），同理、光源灯就改用 一支氘灯了。 （2 ）中、高档型的仪器 为了保障在190～1100nm区域内的高信噪比，目前的仪器均采用两只光源灯互补使用， 即在紫外区采用氘灯，而在可见区使用钨灯，两只灯的选择采用旋转光源镜来切换；图－1 就是这种光源室的鸟瞰实例图（注：图以日立U-3010 机型为例，以下同）； 图中左侧是氘灯，右侧是钨灯，上方是去往单色器的进光孔，下方就是转换光源镜。 图－1、 灯室鸟瞰 （三）光源灯更换后为何要调整？ 分光光度计有一个技术指标，称为“基线噪声”，也就是“信噪比”，英文表示为S/N；简单地 讲信噪比越大测量的结果精度越高。要想达到最佳信噪比，光源的调整就凸现重要了；关于 这个调整的物理意义，用仪器术语解释：就是让光源灯发出的实际光束与光路理论光轴完全 重合。用形象语言解释：就是让光源发出的光束的最强点完全照射到仪器单色器的入口狭缝 的中央处。 由于安装光源灯的灯座一般是固定式的，加之每支灯的构造的微小差异，致使其发射出的光 束在三维空间中的位置也不尽相同；所以更换光源灯后，很难保证光束的最强点照射到狭缝 的中央处，这是客观存在。为此、唯一可以补偿这一缺憾的办法就是调整光源镜的反射角度。 但是对于许多使用者而言，往往不清楚这个调整步骤的重要性。一般来讲、含有氘灯和钨灯 两种光源的仪器的光源镜均可以调整，图－2 就是日立U-3010 分光光度计灯室内光源镜的 示意图： 图－2、光源镜示意图 示意图说明： Screw： 为内六角调整螺丝，共三个，分别为A ，B ，C ； Nut ： 为锁定螺母（调整螺母时先松开锁定螺母，调好后再锁紧）； Screw A ：为氘灯/钨灯垂直光束调整螺丝； Screw B ：为氘灯水平光束调整螺丝； Screw C ：为钨灯水平光束调整螺丝； （四）如何调整光源镜？ （1）准备工作： 光源镜位置调整时，样品室内必须保证无任何样品，如安装有其他附件时（如：积分球、反 射附件等）请暂时取出。同时打开灯室的后盖和上盖，以便更换光源灯和调整光源镜；参看 图-3，4 ： 图－3 、取下灯室后盖 图－4、露出光源镜 （2 ）更换氘灯后的调整方法（适用于U-3010 ）： －测量模式设定为：E(S)或E(R) （单光束模式） －光源设定为：仅用D2 灯 －光电管高压：选固定模式，电压设定为300V左右 －波长设定为：656.1nm （氘灯的特征波长） 仔细调整光源镜A和B两个定位螺钉，使显示屏右上角的能量显示值达到最大。 如图－5： 图－5、调整氘灯光束 说 明： ① 氘灯原本在可见区是没有能量的，但是却在656.1nm处出现一条氘灯的特定谱线，当氘 灯的发射光束达到最佳位置时，这条特殊的谱线峰值也会达到最高，仪器正是利用这个峰值 变化来监控氘灯是否调整到最佳位置的。 ② 实施此项调整时，仪器的测量模式不能选择透过率或吸光度模式，一定要设定为单光束 或能量监测模式，否则氘灯特征谱线看不到。 （3 ）更换钨灯后的调整方法（适用于U-3010 ）： －测量模式设定为：T% －光源设定为：仅用WI灯 －光电管高压：选自动模式 －波长设定为：600nm 仔细调整光源镜A和C两个定位螺钉，使显示屏右上角的透过率显示值最大。 如图－6 所示： 图－6、调整钨灯光束 （五）注意事项： (1)