比色皿与分光光度计注意事项.pdfVIP

玻璃比色皿和石英比色皿辨别、使用和清洗方法 光度分析法是最常用的定量分析方法之一，其主要特点是：(1)应用范围广 泛 。很多物质在紫外-可见光区有吸收，因此可借助于比色法进行测定。(2)适 用的浓度范围广泛，从常量分析到痕量分析(经预富集后)均可实现。(3)灵敏度 高，选择性好，精确度高，分析成本低，操作简便、快速。因此广泛应用于地质、 冶金、化工、医学、食品、制药及环境监测等行业。 在光度法中，比色皿的选择、使用和维护对分析结果有着重要的影响。 比色皿选择与鉴别 比色皿的制造工艺有两种，一种是粘合剂粘合而成，另一种是高温熔融而成。 比色皿的材料通常来源于石英、熔凝硅石和光学玻璃。玻璃比色皿对紫外线几乎 全部吸收，吸光度非常大。而石英比色皿的吸光度则小得多。常用比色皿的形状 有方形、矩形和圆筒形，容量一般为几毫升。也有用于少量试样的微型或超微型 毛细管皿。另外还有高、低温、恒温比色皿。 比色皿有不同的光程长度，一般常用的有0．5、l、2、3、5cm ，选择哪种 光程长度的比色皿，应视分析样品的吸光度而定。当比色液的颜色较淡时，应选 用光程长度较大的如2cm、3cm比色皿；当比色液的颜色较深时，应选用光程长度 较小的如0.5cm 、lcm比色皿，以使所测溶液的吸光度在0.1-0.7之间。 比色皿有方向性。有些比色皿上标有方向标记，使用时必须注意。无方向标 记的比色皿应予以校正，校正时要先确定方向并作好标记，以减少测定误差。比 色皿的校正方法是：将纯净的蒸馏水注入比色皿中，把其中吸收最小的比色皿的 吸光度置为零，并以此为基准，测出其它比色皿的相对吸光度。测定比色液时， 应将其吸光度减去比色皿的吸光度。同一组比色皿相互间的差异应小于测定误差 在测定同一溶液时，吸光度差值应小于0.5％ ，否则应对差值进行校正。 比色皿的光程长度也需校正，校正时可将吸光度约为0.4的溶液分别注入校 正皿和具有准确光程长度的标准比色皿中，测定吸光度。以标准比色皿的吸光度 为1.00，求出校正比色皿吸光度的相对值作为该比色皿的校正系数。测定比色液 时，可将所测得的吸光度乘以该皿的校正系数以得到实际吸光度值。 比色皿选择或使用不当,造成无法测量或引起测量误差的现象在实验中经常 出现，这一问题又很容易被实验人员忽视。 紫外区的定义为 190-400nm，石英比色皿可用于 190-900nm，玻璃比色皿用 于360-900nm，紫外区的一定要用石英比色皿，必须配置紫外/可见分光光度计， 否则低波长段不能分析。 对于一般的非光学专业人员，用眼睛是不能分开石英比色皿和玻璃比色皿的。 但两者硬度差别很大很大。石英比色皿比玻璃比色皿硬度大（绝对值）几十倍， 如果把两个对磨，石英比色皿将很少被磨损，而玻璃比色皿磨损非常大。 由于石英比色皿的透光范围从0.12-4.5 微米(120nm-450nm)，广泛的谱段范 围内没有任何吸收峰。而玻璃比色皿只有0.4—4 微米 （400-4000nm），且有许多 离子吸收峰。所以，石英比色皿要比玻璃比色皿优越的多，化验数据更准确、更 可靠。 用手摸或者肉眼就能观察出来，只有光学技术人员凭经验 “靠肉眼比较折光 率差别”可以准确判定，他们肉眼观察微弱的离子吸收现象，靠经验评价也能区 分。但是，对没有经验的人员来说，极易发生判定错误 方法1 石英比色皿上有一个Q字样(quartz石英)，而玻璃的上面有一个 G字样(glass玻璃)，从字面上可以直接区分两种比色皿，如果字样已经没有啦， 只能上机在紫外区实测啦，在紫外区透过率大是石英的，几乎没有透过率的是玻 璃的。市面上卖的比色皿造型不是完全一样的，有的没有石英标识。可在紫外波 长下检测空比色皿的吸光度，玻璃的吸光度要比石英的大。 方法2 将光度计的波长设定为250nm，样品室内不放任何物品，调零，然后 将比色皿置于样品道一侧，吸光值小于0.07Abs 的是石英材料，反之是玻璃材料。 注：如果吸光值稍稍大于 0.07Abs 的话，有可能也是石英材料的，只不过是杯 子内壁没有洗净之故。 比色皿使用注意事项 比色皿一般为长方体，其底及两侧为磨毛玻璃,另两面为光学玻璃制成的透 光面采用熔融一体、玻璃粉高温烧结和胶粘合而成。在使用比色皿时，两个透光 面要完全平行，并垂直置于比色皿架中，以保证在测量时入射光垂直于透光面， 避免光的反射损失，保证光程固定。使用时应注意以下几点:： 1、拿取比色