茶树CsCBF1基因表达载体的构建及其转基因烟草的抗寒性分析_常欣.pdfVIP

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茶树CsCBF1基因表达载体的构建及其转基因烟草的抗寒性分析_常欣

( ) 第 卷 第 期 西北农林科技大学学报 自然科学版 Vol.40 No.10 40 10   年 月 ( ) Oct.2012 2012 10 JournalofNorthwestA&F Universit Nat.Sci.Ed.         y 网络出版时间: : 1005 - -   网络出版地址: :// / / / htt www.cnki.net kcmsdetail61.1390.S1005.010.html p 茶树 基因表达载体的构建及其转基因 CsCBF1 烟草的抗寒性分析 , , , , 常 欣 庞 磊 李叶云 魏艳丽 江昌俊     ( , ) 安徽农业大学茶叶生物化学与生物技术教育部重点实验室 安徽合肥 230036 [ ] 【 】 , 、 摘 要 目的 通过转基因烟草验证茶树 基因抗寒性功能 为发掘 筛选茶树重要功能基因提供理 CsCBF1     。【 】 , 、 论依据 方法 利用根癌农杆菌介导法将构建的表达载体 导入烟草 通过 和 BI121CsCBF1 PCR RT PCR GUS p - - 。 、 活性染色鉴定外源 基因是否导入并整合到烟草基因组上转录表达 然后将转 型 转 CsCBF1 BI121CsCBF1 BI121 p - p , , 、 ( ) 型和野生型烟草分别置于 和 下处理 后 检测其膜质通透性 丙二醛 含量和叶绿素荧光参数 254 0 ℃ 48h MDA / , 并将 处理 的转 型和野生型烟草置于 下培养 周后观测恢复表型和统计死亡 Fv Fm 0 ℃ 3d

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