质粒提取操作步骤.pdfVIP

SanPrep 柱式质粒DNA 小量抽提试剂盒 产品编号：SK8191/SK8192 包装规格：50 次/100 次 试剂盒组成 组分 SK8191 ，50 次 SK8192 ，100 次 纯化套件（吸附柱+收集管） 50 套 100 套 Buffer P1 14 ml 28 ml Buffer P2 14 ml 28 ml Buffer P3 20 ml 40 ml Buffer DW1 25 ml 50 ml Wash Solution 12 ml 24 ml Elution Buffer 5 ml 10 ml RNase A 2.1 mg 4.2 mg VisualLyse 60 μl 120 μl 操作手册 1 份 1 份 保存方法及注意事项 试剂盒于常温运输，未开启的试剂盒可以于室温（15~25°C）保存，有效期见包装。加入RNase A 后，Buffer P1 请存 放于2~8°C，有效期为半年。其他组分可于室温存放一年，长期存放请置于2~8°C 。 Buffer P3 和Buffer DW1 中含有刺激性的化合物，操作过程中应穿上实验服，戴好乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣 服，防止吸入口鼻。沾染皮肤或眼睛后，请立即用清水或生理盐水冲洗，必要时寻求医生的帮助。 产品介绍 SanPrep 柱式质粒小量抽提试剂盒是生工生物工程（上海）股份有限公司必威体育精装版研制成功的一种质粒小量抽提试剂盒。本 产品采用了一种新型的吸附材料，新吸附柱拥有良好的流速、超强的DNA 结合能力和优秀的洗脱效率。改良的配方使试剂盒 的菌液裂解能力、DNA 与吸附柱的结合能力大大加强，新型裂解染料VisualLyse 的加入让裂解过程变得可视、可控，实现质 粒得率最大化。对于高拷贝质粒，从6 ml 过夜菌液（OD600 = 2.0 ）中可以获得超过35 μg 的质粒DNA。操作过程快速、方 便，无需使用酚/氯仿抽提，无需乙醇沉淀，整个抽提过程可以在20 分钟内完成。由本试剂盒抽提得到的质粒纯度高， OD260/OD280 比值一般为1.8~1.9 之间，OD260/OD230 比值大于2.0，可直接用于转化、DNA 测序、PCR、基于PCR 的突变、 体外转录、酶切等后续实验。 快速操作流程（质粒提取） 1. 准备工作。 检查Buffer P1 中是否已经加入RNase A。 检查Wash Solution 中是否已经加入乙醇。 检查Buffer P2 和P3 是否出现沉淀。 菌体收集 2. 取1.5-5 ml过夜培养的菌液，8,000 × g离心2分钟收集菌体，弃尽培养基。 3. 在沉淀中加入250 μl Buffer P1，彻底悬浮菌体。 4. 加入250 μl Buffer P2，立即温和颠倒离心管5-10次混匀。室温静置2-4分钟。 裂解 5. 加入350 μl Buffer P3，立即温和颠倒离心管5-10次混匀。 6. 12,000 × g离心5-10 分钟。将上清液移入吸附柱，8,000 × g离心30秒，倒