用人角质细胞评价4种化妆品的细胞毒性.pdfVIP

Toxicol 2008V01．22No．1 毒理学杂志2008年2月第22卷第1期JFebruary 中图分类号：R994．3文献标识码：B 文章编号：1002—3127(2008)01—0075—02·安全-I生评价· 用‘人角质细胞评价4种化妆品的细胞毒性 林祥梅1，王建峰1’2，梅琳1，贾广乐1 (1．中国检验检疫科学研究院，北京100029；2．南京农业大学动物医学院) 关键词：人角质细胞；化妆品；细胞毒性；安全性评价 h后加入MTY，每孑L 传统的化妆品安全性评价是在试验动物上进行 个平行孔，继续培养20 20弘l，再培 养4 DMSO，振荡混匀，立即 的，但近年来随动物保护运动的加强，动物福利的理念 h，弃去液体后加入100弘l 逐渐被引入到国际贸易领域中，化妆品的毒性试验或 酶标仪570am波长测定各孔A值。每种样品重复上 过敏性试验逐渐向非动物方面转移…。其中欧盟要求 述实验3次。 在2009年之后，在欧盟范围内禁止用动物进行化妆品 1．5计算方法细胞存活率％=(样品A值一空白 毒性和过敏性实验，也不允许其他成员国从国外进口 组A值)／(阴性对照A值一空白组A值)×IC∞是将细 和销售违反上述禁令的化妆品旧一一，我国目前在化妆品 and 胞存活率对浓度对数作图，按作图法用ED50IC∞ 上尚无进行细胞毒性实验的报道。本研究采用体外细 FORGraded 1．2，13本H．Ono开发)程序 Response(Ver 胞培养技术和噻唑蓝(M1fI)比色法¨刮，比较市售的4 计算出Ic。。 种不同品牌护肤霜的细胞毒性，以探讨化妆品在体外 欧盟国家实验室化妆品毒性的判定标准： 进行毒性实验的技术，从而为我国打破发达国家以动 IC∞≥1．5mgCml，化妆品细胞毒性极小或无；IC卯 物福利为借口形成的贸易壁垒奠定技术基础。 1．5 meCml≥o．5mg／ml，化妆品细胞毒性中等；IC50 0．5mg／ml，化妆品细胞毒性较强。 1材料与方法 1．6统计学方法采用方差分析，数据用贾±s表示。 1．1样品市售的四种品牌护肤霜。阳性对照：十 二烷基硫酸钠(SDS)；二甲亚砜(DMSO)；阴性对照： 2结果与讨论 mdified Eagle’ Dulbecco改良的Eagle培养基(DulbeCCO’s 2．1 细胞生长一般情况 在加样后12、16、20h，阳性 smedium，DMEM)。 对照组细胞数量明显减少，细胞大量坏死、崩解；阴性 1．2试剂与仪器DMEM培养液(美国，GIBCO)，含 对照组细胞形态正常，数量明显增加，生长良好；样品 10％标准胎牛血