用蛹虫草固体发酵法高效生产虫草素的研究.PDF

第３３卷第１９期 　　　 中国 中药杂 志 Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ　１９ ２００８年１０月 　　　　　　　　　ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ　　　　　　　　Ｏｃｔｏｂｅｒ，２００８ ·研究论文 · 用蛹虫草固体发酵法高效生产虫草素的研究 １，２ ３ ２ １ ３ 韦会平 ，叶小莉 ，张华英 ，李学刚 ，钟运俊 （１．西南大学 药学院，重庆４００７１６；２攀枝花学院 医学院，四川 攀枝花 ６１７０００； ３西南大学生命科学学院，重庆４００７１６） ［摘要］　目的：研究并建立用蛹虫草固体发酵方式高效生产虫草素的最佳方法。方法：通过对不同菌株在固 体发酵过程中各生长期的虫草素含量变化进行跟踪测定以及正交旋转组合设计、正交试验设计等方法，对影响虫 草素产量和含量的各影响因子（包括菌种、生长期、培养基配方和环境条件等）进行系统优化。结果：ＪＦ１是虫草素 －１ 生产的最佳菌株，现蕾期是收获提取虫草素的最佳时期；最佳的培养基配方为水料比１１∶１（ｍＬ·ｇ ），营养水中 －１ 酵母膏、蛋白胨、葡萄糖的用量分别为２２６，６０，２５４ｇ·Ｌ ，营养水 ｐＨ６６；最佳的环境条件为：光照强度 ４４００ｌｘ，每日光照时间１８ｈ，温度１８～２２℃。结论：用以上方法固体发酵生产虫草素，经过约１３ｄ的培养，培养基 中虫草素达到０６０％，比传统液体发酵方法的最高产量高近２倍，并且培养时间缩短２ｄ。 ［关键词］　虫草素；蛹虫草；固体发酵；生物制药 ［中图分类号］Ｓ５６７　［文献标识码］Ａ　［文章编号］１００１５３０２（２００８）１９２１５９０４ 　　虫草素（ｃｏｒｄｙｃｅｐｉｎ，３′ｄｅｏｘｙａｄｅｎｏｓｉｎｅ）为蛹虫 强食用菌开发公司），ＨＪ１（华中农业大学），Ｋ１（山 ［１］ 草的次生代谢产物 ，有抗肿瘤、抗菌等多方面的 东虫草科技园），ＪＦ１（重庆市药物种植研究所自育 ［２７］ 药理功效 ，并可作为核酸和染色体复制的终止 子实体生产高产品种）。 ［８］ 剂 ，在生理生化研究方面有重要用途。目前，虫 １．２　固体发酵方法 草素主要从蛹虫草子实体中提取，但由于子实体生 １．２．１　液体种子制备　培养液配方为水１Ｌ，马铃 产周期长，产量低，虫草素含量较低，故虫草素生产 薯２００ｇ，酵母膏 １０ｇ，蛋白胨６ｇ，葡萄糖３０ｇ， 成本极高，这已经成为制约虫草素进一步研究和开 ＫＨＰＯ２ｇ，ＭｇＳＯ０５ｇ。用２５０ｍＬ培养瓶装培养 ２ ４ ４ 发利用的瓶颈［９］。近年来，许多研究者试图通过蛹 液，每瓶装约 ８０ｍＬ，按照常规方法制备液体菌 ［１０１３］ 虫草液体培养来提高虫草素的生产效率 ，其中 ［１４］ 种 。 ＳｈｉｈＩＬ等通过大约１３ｄ的液体培养，使液体培养 １．２．２　固体发酵方法　用５００ｍＬ罐头瓶装培养 ［１３］ 基中虫草素达到大约０２３％ ，此为报道的世界上 基，每瓶装大米３０ｇ、水３３ｍＬ。营养水的配方为： 虫草素生产的最高水平。本研究对蛹虫草固体发酵 水１Ｌ，葡萄糖２０ｇ，酵母膏５ｇ，蛋白胨６ｇ，ＫＨＰＯ