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生化基础知识-比色法

比色法原理 (分光光度法);多么美丽五彩斑斓的春天啊; 为什么上述溶液呈现不同的颜色?;自然光-赤橙黄绿青蓝紫;波长决定颜色;光谱-连续不同波长光的集合;物质对不同波长光的选择性吸收; 由于物质对不同波长光的选择性吸收而引起,物质呈现的是被吸收颜色的互补色。; 现在知道她的秘密了吗?;脑筋急转弯;透光度 (透射比)Transmittance;T、A与颜色的关系 --------------------- 透光率(T) 吸光度(A) --------------------- 1 0.000 0.75 0.125 0.5 0.301 0.25 0.602 0.17 0.770 0.1 1.000 0.05 1.301 0.01 2.000 0.001 3.000 ---------------------;测量物质光吸收的装置-比色计; 比色计或分光光度计;物质的光吸收曲线-定性分析;吸光度与光径的关系;吸光度与浓度的关系;朗伯-比尔定律: A=-lgT=KCL;透光度(transmittance,T,透射率) T=It / I0 吸光度(absorbance,A) 光密度(optical density,D或OD) A =-lgT = lg I0/It Lamb-beer定律:A=KCL K为吸光系数,C为浓度,L为光径cm 摩尔吸光系数ε:当C=1mol/L,L=1cm,A= ε;比色定量——与标准浓度物质溶液比较;目视比色法; 比色计或分光光度计;比色法成立的基础; 比色法

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