磁珠法[多糖多酚]植物组织基因组DNA提取试剂盒.docVIP

磁珠法·自动化：为生命科学提供自动化磁纳米捕获方案 磁珠法多糖多酚植物组织基因组DNA提取试剂盒  PAGE \* MERGEFORMAT 4  PAGE \* MERGEFORMAT 5  PAGE \* MERGEFORMAT 1 磁珠法多糖多酚植物组织基因组DNA提取试剂盒 MagBeads Polysaccharide Polyphenol Plant Genomic DNA Extraction Kit 【目 录 号】PTDE-6005、PTDE-6030； 【运输条件】2~25℃； 【保存条件】磁珠分散液、β-巯基乙醇2~8℃；蛋白酶K -20℃；其它组分室温保存； 【试剂盒组成】 Kit Component 试剂盒组成PTDE-6005 （50T）PTDE-6030 （300T） = 1 \* GB3 ① PTDE-Buffer 裂解液21mL125mL = 2 \* GB3 ② PTDE-Binding Buffer 结合液12mL (使用前加入18mL异丙醇)70mL (使用前加入105mL异丙醇) = 3 \* GB3 ③ PTDE Magnetic Beads 磁珠悬浮液4mL24mL④ Wash Buffer 清洗液30mL180mL⑤ Proteinase K 蛋白酶K1mL6mL⑥ β-ME β-巯基乙醇42μL250μL⑦ Dealcohol Buffer 除醇液20mL120mL⑧ Elute Buffer 洗脱液5mL30mL【注意事项】 使用前请检查裂解液（组分①）和结合液（组分②）是否出现结晶，如有结晶请置于65℃温浴至重新溶解完全； 初次使用全新试剂盒前，请按照结合液（组分②）标签标注量加入异丙醇，稀释备用； 磁珠悬浮液（组分③）不可反复冻融或离心，使用前需充分摇匀； 蛋白酶K（组分⑤）于-20℃长期保存，避免反复冻融；融化后4℃保存，并尽快使用； 请仔细阅读本说明书，并按照操作指南建议操作。 【产品简介】 本试剂盒采用针对富含多糖多酚植物组织进行杂质去除的特殊磁珠，配合高性能缓冲液体系，可从各种富含多糖多酚植物组织样本中高质量的分离纯化基因组DNA。 特殊技术包埋的磁珠在特定条件下对核酸具有极强的亲和力，而当条件改变时，磁珠会释放所吸附的核酸，从而达到快速分离纯化核酸的目的。提取所得的基因组DNA产物片段大、纯度高、质量稳定可靠，尤其适合高通量仪器自动化提取，特别是本公司生产的各类型号自动化核酸提取仪或工作站。使用本试剂盒纯化所得核酸产物可适用于各种常规分子生物学下游实验，如：酶切、 PCR、荧光定量PCR、文库构建、Southern杂交、芯片检测和高通量测序等。 【试剂盒说明】 样本类型最适提取量核酸得量范围各种类型富含多糖多酚植物组织20~100mg3~25μg【自备仪器及耗材】 研钵研磨棒(或者研磨机、匀浆机)、水浴锅、涡旋混合仪、高速离心机、EP管（1.5mL或2.0mL）、EP管配套用磁力架、核酸提取仪（仪器自动版操作步骤需准备）。 【自备试剂】 液氮、乙醇(80%, v/v)、异丙醇、RNase A溶液(100mg/mL，分散液10mM Tris-HCl, 1mM EDTA, pH值8.0)。 【仪器自动法版操作步骤】 该方法配合磁棒法核酸提取仪使用，以英芮诚ETP-300型全自动核酸提取仪为例，可同步完成32份植物样本提取工作。 准备96孔板 参照下表用量，向96孔板相应孔位中分别加入对应试剂： 样品位1、72、83、94、105、116、12试剂磁珠悬浮液 80μL清洗液 600μL 结合液550μL （已加入异丙醇）80%乙醇600μL80%乙醇600μL除醇液400μL洗脱液100μL注：1）每次吸取磁珠悬浮液前尽量摇晃均匀；2）为提高效率建议使用排枪。 组织样本前处理和裂解 取适量(≤100mg)植物组织样本，液氮研磨至粉末状，尽量完全转移至EP管中。加入400μL裂解液、0.8μL β-巯基乙醇和20μL蛋白酶K，涡旋振荡1~3min至混合均匀，呈云雾状。65℃温浴15min，每隔5~10min上下颠倒混匀一次。 注：1）若样本量大于100mg，但不超过400mg，需增加裂解液使用量，可按照每增加100mg组织样本增加150μL裂解液使用量，并延长裂解时间，其余试剂用量不变； 若样本个数较多，可预先将蛋白酶k、β-巯基乙醇和裂解液提前混合备用； 如需去除RNA，需在加入蛋白酶K之前额外加入5μL RNase A溶液。 上机提取 将裂解完毕样本室温（勿低于15℃）、13000rpm离心10