玉米叶面微生物DNA提取方法及PCR引物的筛选.pdfVIP

山 东 农 业 科 学 ????，?????：?— ??? ?????????????????????????????? 玉米叶面微生物 ???提取方法及 ???引物 的筛选? 赵? 辉? ，李世 国?，孙红 炜?，李? 凡?，田晓燕? ，颜世 磊? ，路兴波。? ??．山东师范大学生命科学学院，山东 济南 ??????；?．山东省农业科学院植物保护研究所 ，山东 济南? ???????? 摘 要 ：传统 的微生 物培 养方法在反映叶面微生态信息上具有局 限性 ，因此逐渐被分子生态学所代替 ，而? 获得 高质 量 、大片段 、无偏好 的总 ???是研 究叶 面环境微 生物 的基础 。本 文采用 改进 的 ????????法 、????? 法 、改 良的化学法 以及试剂盒 法对 玉米生长初期 、中期 、末期 的叶面微生物总 ???进行提 取 ，并对 ?种方 法提? 取 的 ???片段的大小和产量进行综合评价 。将得 到的 ???用引物 ???／???以及 ???／????对细菌 ????????? 进行 扩增 ；用 ?种常见引物 ???／????、????一?／????、???／???、???／?????、???一????／???一????对真菌 ???? ????进行扩增 。结果表 明 ：?种方法提取的 ???片段 均适用 于 ???，但 ???的得率和纯 度有一定 差别 ，其? 中以试剂 盒提取效果最好 。???结果显示 ，除化学法外 ，其他 ?种方 法提取 的 ????均能 够获得 目的条带 ；并? 通过 比较得 出引物 ???／????对 ???????? 以及 ????一?／????对 ????????扩增效果较好且扩增量最大 。? 关键 词 ：玉米 ；叶面微生物 ；???提取 ；???；????????；????????? 中图分类号 ：????? 文献标 识号 ：?? 文章编号 ：???—????????????—????—??? ????????????????????????????? ??????????????????????? ????? ????????? ?? ?????? ?? ????????????