L-丝氨酸的酶法合成及选读.pptxVIP

L-丝氨酸的酶法合成及分析;基础知识;;;L-丝氨酸的合成;材料、试剂、仪器： 1、原料：细菌破碎上清液 2、主要试剂 甘氨酸、甲醛、四氢叶酸、氯化钠、葡萄糖、无水乙醇、氯化钙、氢氧化钠 3、主要仪器 电子天平，无菌超净工作台，高速离心机、恒温培养箱;;;;;;丝氨酸的分离与分析检测;;;;步骤 1、制板 称取层析用的硅胶G3g加9mL0.5%羧甲基纤维素钠（CMCNa）,在烧杯中调成均匀糊状，迅速地倾在1块6×15cm的玻璃板上（玻璃板要清洁平整，无油污），小心将玻璃板轻轻振荡和倾斜，使硅胶均匀铺在玻璃板上。室温下静置半小时，移至105℃烘箱中烘烤1h，选择厚薄均匀平整的板使用。 （活化：制得的硅胶板如果长时间暴露在外面，在使用前应放入110℃烘箱中烘烤30分钟，去除水分。）;;;;;;4. 层析用硅胶为一多孔性物质，分子中具有硅氧烷的交链结构，同时在颗粒表面又有很多硅醇基。硅胶吸附作用的强弱与硅醇基的含量多少有关。硅醇基能够通过氢键的形成而吸附水分，因此硅胶的吸附力随吸着的水分增加而降低。若吸水量超过17％，吸附力极弱不能用作为吸附剂，但可作为分配层析中的支持剂。对硅胶的活化，当硅胶加热至100～110℃时，硅胶表面因氢键所吸附的水分即能被除去。当温度升高至500℃时，硅胶表面的硅醇基也能脱水缩台转变为硅氧烷键，从而丧失了因氢键吸附水分的活往，就不再有吸附剂的性质，虽用水处理亦不能恢复其吸附活性。所以硅胶的活化不宜在较高温度进行。 ;