牡丹根部内生细菌的分离鉴定及脂肽类物质的拮抗活性研究.PDFVIP

微生物学通报 Jun. 20, 2015, 42(6): 1081?1088 Microbiology China ? 2015 by Institute of Microbiology, CAS tongbao@ DOI: 10.13344/j.microbiol.china.140628 简 报 牡丹根部内生细菌的分离鉴定及脂肽类物质的拮抗活性 研究 杨瑞先* 姬俊华 王祖华 刘萍 薛冬 王瓒杨 (洛阳理工学院 环境工程与化学系 河南 洛阳 471023) 摘 要：【目的】从牡丹(Paeonia suffruticosa Andr.)根部组织中分离鉴定内生细菌，测定拮抗菌株 脂肽类活性物质的体外抑菌活性。【方法】采用平板对峙法筛选对牡丹灰霉病菌(Botrytis paeoniae Oadem)、牡丹炭疽病菌(Gloeosporium sp.)、牡丹黑斑病菌(Altenaria sp.)、牡丹黄斑病菌(Phyllosticta commonsii)有拮抗作用的内生细菌。基于形态特征、生理生化特性和 16S rRNA 基因序列同源性 鉴定拮抗菌株。根据脂肽类抗菌物质合成相关基因序列对拮抗菌株进行基因扩增检测，采用酸沉 淀法提取拮抗菌株的脂肽类物质，平板对峙法测定脂肽类物质的体外抑菌活性。【结果】从牡丹 根部组织中共分离获得 62 株内生细菌，其中菌株 Md31 和 Md33 对 4 种病原菌均有较明显的抑 制作用。Md31 和 Md33 被鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。通过对菌株 Md31 和 Md33 进行 5 个脂肽类合成功能基因 bmyB、fenD、ituC、srfAA 和 srfAB 的检测，序列同源性 分析，表明两个菌株具有合成脂肽类物质的能力。菌株 Md31 和 Md33 的脂肽类粗提物对所测试 的牡丹病原真菌均具有不同程度的抑制作用。【结论】获得了 2 株对牡丹病原菌有良好抑制效果 的解淀粉芽孢杆菌 Md31 和 Md33，2 个菌株的脂肽类粗提物也具有较强的体外抑菌活性，该研 究为牡丹内生细菌的进一步开发应用奠定了基础。 关键词：牡丹，内生细菌，拮抗活性，鉴定，抗菌脂肽类物质 Isolation, indentification and inhibitory activity of lipopeptides of endophytic bacteria from the root of Paeonia suffruticosa YANG Rui-Xian * JI Jun-Hua WANG Zu-Hua LIU Ping XUE Dong WANG Zan-Yang (Department of Environmental Engineering and Chemistry, Luoyang Institute of Science and Technology, Luoyang, Henan 471023, China) Abstract: [Objective] To isolate and identify endophytic bacteria from the roots of Paeonia suffruticosa and ev