R010A-UM PrimeSTAR高保真PCR酶说明书.pdfVIP

Code No. R010A 研究用 PrimeSTAR? HS DNA Polymerase 说明书 v201302Da 目 录 内 容 页 码 ● 制品说明 1 ● 制品内容 1 ● 保 存 1 ● 特 点 1 ● PCR 反应液组成 3 ● PCR 反应条件 3 ● 最适参数的设定 4 ● 扩增产物的电泳、克隆及测序 5 ● Troubeshooting 5 ● 实验例 5 ● 制品说明 PrimeSTAR HS DNA Polymerase是兼具高保真性和高扩增效率的PCR用DNA聚合酶。因其具有极强的3’→ 5’Exonuclease活性而显示出超群的校正功能。制品中添加了在常温状态下能够抑制DNA Polymerase活性 及3’→5’Exonuclease活性的抗体，有效防止PCR反应前的引物错配和引物消化。与最适反应Buffer配合使用， 可以实现对广泛靶序列的高保真性、高灵敏度、高特异性、高成功率的扩增，对于cDNA克隆等要求高保真 的PCR反应发挥最强大的威力。 ● 制品内容 （200 次量） PrimeSTAR HS DNA Polymerase（2.5 U/μl） 100 μl 5×PrimeSTAR Buffer（Mg2+ plus）* 1 ml×2 dNTP Mixture（各 2.5 mM） 800 μl * Mg2+浓度为5 mM（5×）。 ● 保 存： -20℃ ● 特 点 A. 保真性 通过分析大量序列数据检验PrimeSTAR HS的突变频率。 【方法】 以Thermus thermophilus HB8 genomic DNA为模板，任选8个富含CG的区域（各约500 bp），使用 PrimeSTAR HS及其他几种不同高保真酶进行PCR扩增后，将各自PCR产物克隆到合适的载体中，并 对每种序列挑取复数的克隆进行测序。 【结果】 分析使用PrimeSTAR HS扩增的DNA片段序列，249,941个数据中只有12个数据显示错配。其保真性比 Company A的高保真酶高，且为Taq DNA Polymerase的10倍。 这种检测突变率的方法是实际PCR反应中最适合获得保真度的方法。基于以