串联表达NAD激酶和谷氨酸脱氢酶基因对L-谷氨酸产量的影响.pdfVIP

现代食品科技 Modern Food Science and Technology 2013, Vol.29, No.7 串联表达 NAD 激酶和谷氨酸脱氢酶基因 对 L-谷氨酸产量的影响 张大龙 1,2,3，徐庆阳 1,2,3，张成林 1,2,3，邱博 4，万红兵 4，王晋 4，谢希贤 1,2,3 (1.天津科技大学生物工程学院,天津 300457)(2.天津市氨基酸高效绿色制造工程实验室,天津 300457) (3.代谢控制发酵技术国家地方联合工程实验室,天津 300457)(4.北京轻发生物技术中心，北京 100037） 摘要：由 ppnk 和 gdh 编码的 NAD 激酶和谷氨酸脱氢酶是 L-谷氨酸合成途径中的两个重要酶。以谷氨酸生产菌 CN1021 基因组 为模板 PCR 扩增 ppnk 和 gdh 基因并转化至该菌中，检测上述两个基因单独表达和串联表达对 L-谷氨酸产量的影响。结果表明，当 两个基因单独过表达时，其酶活性分别提高 2.4 和 2.1 倍，L-谷氨酸产量分别提高 7.9%和 1.4%。当将两个基因串联表达时，其酶活 性分别提高 2.0 和 1.5 倍，L-谷氨酸的产量却提高了 13.2%。说明过表达 ppnk 和 gdh 能够有效提高 L-谷氨酸产量，且具有协同作用。 关键词：NAD 激酶；谷氨酸脱氢酶；谷氨酸生产菌 CN1021；基因串联表达 文章篇号：1673-9078(2013)1-1555-1558 Effect of Co-expression of ppnk and gdh on L-glutamate Production ZHANG Da-long1, 2, 3, XU Qing-yang1, 2, 3, ZHANG Cheng-lin1, 2, 3, QIU Bo4, WAN Hong-bing4, WANG Jin4, XIE Xi-xian1, 2, 3 (1.College of Biotechnology of Tianjin University of Science and Technology, Tianjin 300457, China) (2.Tianjin Engineering Lab of Efficient and Green Amino Acid Manufacture, Tianjin 300457, China) (3.National and Local United Engineering Lab of Metabolic Control Fermentation Technology, Tianjin 300457, China) (4.Beijing Qingfa Biotechnology Center, Beijing 100037, China) Abstract: The ppnk and gdh encoding NAD kinase (NADK) and glutamate dehydrogenase (GDH) were two important enzymes in the glutamate biosynthesis pathway. The two genes were amplified by polymerase chain reaction (PCR) from the glutamate-produ