pMD19-T Simple Vector的结构.pdf

TaKaRa Code：D104A pMD?19-T Simple Vector 说明书 宝生物工程(大连)有限公司 目 录 内 容 页 码 ● 制品说明 1 ● 制品内容 1 ● 保 存 1 ● 纯 度 1 ● 用 途 1 ● pMD?19-T Simple Vector的结构 1 ● 实验操作 2 ■ Control DNA 片段的克隆实验 2 ■ 一般 DNA 片段的克隆实验 2 ■ 一种可供选择的快速克隆法 3 ● 相关说明 4 ● 使用注意 4 ● QA 5 ● 制品说明 pMD?19-T Simple Vector是一种高效克隆PCR产物（TA Cloning）的专用载体。本载体由pUC19 载体改 建而成，它消除了pUC19 载体上的多克隆酶切位点，再在pUC19 载体的多克隆酶切位点处导入了EcoR V 酶切位点，使用EcoR V进行酶切反应后，再在两侧的 3‘ 端添加“T”而成。因大部分耐热性DNA聚合酶进 行PCR反应时都有在PCR 产物的 3’ 末端添加一个“A”的特性，所以使用本制品可以大大提高PCR产物的 连接、克隆效率。 本载体尽管消除了 LacZ 基因上的多克隆酶切位点，但不影响β-半乳糖苷酶的正常表达，因此，PCR 产物 克隆后仍可以利用 α-互补性进行蓝白菌落的筛选，挑选阳性克隆。 由于本载体上消除了多克隆酶切位点，克隆后的 PCR 产物将无法使用载体上的限制酶切下，需要在 PCR 扩增引物上导入合适的酶切位点。此时如果使用 PCR 扩增引物导入的酶切位点进行 DNA 酶切时，酶切 反应将不会受