5-气相色谱.ppt

（三）气相色谱 ——气体为流动相的色谱法。 含有挥发性成分、主为脂肪酸类成分的药材 气-固色谱法(GSC) 气-液色谱法(GLC) 填充柱(id 4mm)色谱法 毛细管柱(id 0.1～0.5mm)色谱法 吸附色谱法 气-固色谱法 分配色谱法 气-液色谱法; 原理 利用样品中各组分在固定相(液)与载气两相中的分配系数（吸附）不等而实现分离。 优点 分离效能高、选择 性好、灵敏度高、样品用量少、 分析速度快及应用广。 GC指纹谱——表征其提 取物的相对化学组成和分布特征， 据成分的组成和分布→评价药材内在质量; 1 色谱参数 （1）基线和噪音 基线——在操作条件下，检测器中只有流动相通过或虽有样品的浓度变化而不能为检测器所检出所得到的流出曲线。 噪音——各种未知的偶 然因素引起基线起伏的现象。 基线反映仪器的噪音变化。 （2）漂移 基线随时间 朝某一方向的缓慢变化。 ; （3）保留值 ——色谱定性参数： 保留时间(tR)、死时间(to)、调整保留时间(t′R)：t′R＝tR-to、保留体积(VR)：VR＝tR·Fc、死体积(Vo)：Vo＝to·Fc、调整保留体积(V′R)：V′R＝VR-Vo＝t′R·Fc等，Fc为载气的线速。 tR—考察GC指纹图谱重现性最直接、最直观的指标。 （4）相对保留值(r)——两组分的调整保留值之比，又称选择性因子(α)，即： r2，1＝t′R2 /t′R1＝V′R2/V′R1＝k2/ k1 r——指纹图谱重复性研究的重要指标。; （5）保留指数(I) 以正构烷烃系列作为组分相对保留值的标准，用两个保留时间紧邻待测组分的一对参考物质(正构烷烃)来标定组分，所得的相对值称为保留指数： lgtR(x)-lgtR(z) Ix＝100[Z + n ----------------- ] lgtR(z+n)-lgtR(z) Z与Z+n为正构烷烃对的碳数，n常为1。规定正构烷烃的保留指数为碳数乘100，如正己烷的保留指数为600，其它类推。任何物质的保留值均落在某两正构烷烃对（Z与Z+1）保留值之间。; lg rx/z Ix＝100Z +100 ----------- lg r(z+1)/(z) 保留指数——国际公认的GC定性指标 保留指数与分子结构有关，因此是常用的定性参数。鉴于保留指数的高度重现性和准确度，在气相色谱指纹图谱研究中，中药组分保留指数的指纹特征获得了重要应用。（中药组分复杂，无法插入正构烷烃；组分多未知，如何选取？） ; （6）色谱峰区域宽度 ——色谱柱柱效参数。 标准差(σ)——组分被带出色谱柱的分散程度，σ越大，流出组分越分散；σ越小，组分越集中，柱效越高。半峰宽(W1/2)、峰宽(W)与σ的关系： W=4σ， W＝1.699 W1/2， W1/2＝2.355σ 获得良好指纹图谱的前提——获得高柱效，即σ、W1/2、W的数值较小，峰对称性良好。 （7）相平衡参数 分配系数(K)——达到分配平衡时，组分在固定相(Cs)和流动相(Cm)中的浓度之比： K=Cs/Cm 容量因子(k)——组分在两相中的质量之比(Ws／Wm)：k=Ws／Wm=CsVs/CmVm=K(Vs/Vm) =t′R / to; K、k与柱效参数及定性参数密切相关，是最重要的色谱参数之一。 (8)色谱峰的峰高和峰面积——指纹图谱研究的基本参数。由数据处理机或色谱工作站经自动打印或显示出峰高(h)及峰面积(A)，以相对峰面积最为常用。 ; 色谱峰描述的四基本参数： 峰高(h)或峰面积(A) 峰位(tR，t′R，ris，Ix等) 峰宽(σ，W1/2，W) 对称因子T(对称峰：0.95～1.05，前延峰： 0.95；拖尾峰1.05) GC色谱仪的六基本单元： ; 2 填充柱气相色谱 ——固定相填充在id 4mm柱管内的色谱柱： 玻璃管柱（硼硅玻璃）：化学惰性好，柱效高，分离效果