选修一1-4细胞培养技术和分子生物学技术教学.pptVIP

;年份及考卷; 自主梳理 1．原理 (1)植物细胞全能性的概念：高度分化的植物细胞，仍然具有发育成完整植株的潜能。; (2)高度分化的植物细胞全能性表达的条件 ①离体条件； ②无菌操作(防止杂菌污染)； ③适宜物质的诱导和调节(激素主要是生长素、细胞分裂素等)； ④种类齐全、比例适合的营养物质； ⑤温度、酸碱度、光照等条件的控制。; 2．基本过程; 3．影响植物培养的因素 (1)外植体的选取 ①不同植物的组织培养难度不同。 ②对于同一种植物材料，材料的年龄，保存时间的长短等也会影响实验结果。生长旺盛的嫩枝生理状况好，容易诱导脱分化和再分化。;(2)培养基的配制(MS培养基) ①大量元素：C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S。 ②微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co。 ③有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等。 ④pH、温度、光照 不同的植物对各种条件的要求往往不同。菊花适宜条件：pH在5.8左右；温度控制在18～22℃；每日日光灯光照12h。; 1如图为科学家将胡萝卜韧皮部的细胞培养形成胡萝卜植株的过程示意图(注：胚状体即等同于植物种子的胚的结构)。;请据图完成下列问题： (1)由细胞团形成胚状体要经过________过程。 (2)这种培养方法在生物技术中称为________培养。 (3)培养基中除了需要水分和有机营养物质外，还需要加入________和________。培养过程必要的外界条件是适宜的温度、________和________等。 (4)由胡萝卜韧皮部细胞培养成完整的胡萝卜植株证明了___________________________________________，;解析　植物组织培养的理论基础是细胞的全能性；由细胞团发育成植物幼苗需经细胞分裂和细胞分化两个过程；植物组织培养所用的培养基中应含有植物生长发育所需的各种营养物质，为诱导根或芽的分化还应加入生长素、细胞分裂素两种植物激素，并保证适宜的外界环境。 答案　(1)细胞分裂和细胞分化　(2)组织　(3)矿质元素　生长调节类(激素)物质　光照、氧气　无菌　(4)植物细胞具有全能性; 月季花药培养时的花粉粒最好是 (　　) A．四分体时期　　　　　 B．单核居中期 C．单核靠边期 D．二核或三核花粉粒 答案　C 解析　花粉发育过程中，只有某一个时期对离体刺激敏感。一般来说，在单核期细胞核由中央移向细胞一侧的时期，花药培养成功率最高。; 自主梳理 一、DNA的粗提取和鉴定 1．基本原理 (1)DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，在0.14 mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低； (2)DNA不溶于酒精溶液； (3)DNA不被蛋白酶所水解； (4)DNA可被二苯胺染成蓝色。 ;2．方法目的;二、多聚酶链式反应扩增DNA片段 1．细胞内DNA复制与PCR技术的比较;三、血红蛋白的提取和分离 1．方法及原理;2.实验操作程序 (1)样品处理 ①红细胞的洗涤：除去血浆蛋白等杂质，有利于后续步骤的分离纯化； ②血红蛋白的释放：使红细胞涨破，血红蛋白释放出来； ③分离血红蛋白溶液：经过离心使血红蛋白和其他杂质分离开来，便于下一步对血红蛋白的转化。; (2)粗分离——透析：除去样品中分子量较小的杂质。 (3)纯化：一般采用凝胶色谱法对血红蛋白进行分离和纯化。 (4)纯度鉴定：一般用SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳方法，来测定蛋白质的分子量，即对血红蛋白进行纯度鉴定。; 感悟拓展 1．DNA的粗提取实验 ①哺乳动物成熟的红细胞中不含细胞核，也没有DNA，不适于作DNA提取的材料，但却是提取血红蛋白的理想材料。②实验过程中两次用于蒸馏水，第一次目的是使成熟的鸡血红细胞涨破释放出DNA，第二次目的是稀释NaCl溶液。; 2．PCR技术反应过程中控制不同温度的意义 (1)90℃以上时变性，双链DNA解聚为单链； (2)50℃左右时复制，引物与两条单链DNA结合； (3)72℃左右时延伸，Taq DNA聚合酶有最大活性，使DNA新链由5′端向3′端延伸。; 2一个由32P标记的DNA分子，放在未标记的环境中培养，复制5次后标记的DNA分子占DNA分子总数的 (　　) A．1/10　　　　　　　　 B．1/16 C．1/25 D．1/32;解析　一个DNA分子n次复制后产生的DNA数目为2n，而DNA复制是半保留复制，其特点是：新形成的DNA双链一条是来自亲代的DNA分子的母链，另一条是新形成的子链。这样最初由32P标记的DNA分子复制后，其标记的两条链就分别进入两个子代DNA分子中，即两个子代DNA分子被标记了。然而由于是在未标记的环境中培养，不论多少次复制，只有最初标记过的两条链存在的两个DNA分子中含32P，这样经n次复