甘草炮制的高效液相色谱研究.pdfVIP

D25甘草炮制的高效液相色谱研究 孟翔宇刘志强$刘淑莹 中国科学院长春应用化学研究所吉林长春130022 摘要：采用高效液相色谱法优化了甘草炮制的温度和时间。以甘草中主要药效成分甘草苷和甘 草酸为考察对象，优化了甘草炮制的温度和时间。最佳炮制条件为：烘烤时间2h、烘烤温度 110。C。结果表明：高效液相色谱法测定甘草苷和甘草酸含量简便、快捷、准确。通过该方法 确定的炮制方法便于控制和统一炮制品品质。 的143个处方中，有近60％的处方含有甘草。中医学认为：甘草有解毒、调和药性的作用， acid)为甘草中的主要药效成分。甘草在处方中应用以蜜炙甘草形式居多，本文采用蜜拌甘草 烘烤法炮炙甘草，使炮制条件便于控制。通过HPLC方法对甘草酸和甘草苷进行定量分析， 确定烘烤时的烘烤温度和烘烤时间。现有报道利用薄层层析法、紫外分光光度法测定炮制前 后甘草酸、甘草苷含量变化【1，21，但无优化炮制条件的报道。 1．实验部分 1．1试剂、仪器 蜂蜜为市售，购回后炼制中蜜备用；甘草市售(白城)；甲醇色谱纯；水为超纯水(18．2M Co,， Milford，MA，USA)。 液相色谱条件：DIKAMAODS．C18色谱柱，5／am，4．6mmX250mm；流动相： 甘草苷：乙腈一O．5％冰醋酸(1：4)；检测波长为276nm。进样量20旺。 1_2实验方法 1．2．1甘草炮制： 取蜂蜜369，水189混匀，取甘草2409与蜂蜜拌匀闷润过夜。 烘烤时间的影响：设置烘箱温度90。C，取样品1209分为五份，分别烘烤2h，3h，4h， 5h，6h。取出放凉粉碎备用。 烘烤温度的影响：取上述润透甘草适量，取样品1209分为五份，设置烘箱温度80。C，95 ℃，110℃，125℃，140℃，分别烘烤2h。取出放凉粉碎备用。 1．2．2标准品制各： 称取O．57rag甘草酸标准品甲醇定容于2ml容量瓶备用：称取甘草苷标准品适量，配制 50州ml甘草苷标准品备用。 1．2．3样品制备： 甘草酸测定用样品：取本品粉末约0．39，精密称定，置50ml容量瓶中，加流动相约45m1． 超声处理(功率250W，频率20kHz)30分钟，取出冷却，流动相定容，滤过。 瓶中，用20％乙腈定容摇匀。 2．结果与讨论 用烘箱烘烤炮制甘草，操作简便，安全可靠，便于控制。甘草苷与甘草酸是甘草中主要 药效成分，故选用甘草苷和甘草酸含量做为考察指标，优化甘草炮制的烘烤温度和烘烤时间。 2．1不同烘烤时问的影响 为考察不同烘烤时间对甘草炮制的影响，按1．2．1中烘烤时间的影响项下方法制各炮制品。 应用1．2．3项下方法分别配制甘草酸和甘草苷测定用样品。采用1．1中液相条件分别测定炮制 品中甘草酸和甘草苷含量。定量法采用外标一点法。不同时间结果见图1。 不同烘烯时间含量变化 不同烘烤温度的影响 l i 啊篓陋 O 5 图1供愕时间对炮制品中甘草酸和甘覃苷音量的影响 图2烘烤温厦对炮制品中甘草酸和甘草苷雷量的影啊 由图1可以看出甘草酸含量在4h时达到峰值，2h时含量次之；甘草苷含量在2h时为峰 值．3h为最低值，之后含量升高，5h之后含量稳定。考虑到2h时无论甘草酸还是甘草苷含 量均为较高值，且炮制时间最短，选择炮制时间为2h。 2．2不同烘烤温度的影响 在考察烘烤温度的影响时，设定烘烤时间为2h。按1．2．1中烘烤温度的影响项下方法炮 制甘草。按照1．2．3项下方法分别配制甘草酸和甘草苷测定用样品。不同时间结果见图2。 由图2可知，甘草酸和甘草苷含量变化有相似的趋势，先降后升再降，最后达到稳定。 在110。C时甘草酸含量最高，甘草苷含量仅次于80。C时，又80。C时炮制品未全干，不便于保 存，所以选用1104C为最终烘烤时间。 3结论 本文采用药