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泌尿生殖道标本浓度对支原体检测的影响.doc
泌尿生殖道标本浓度对支原体检测的影响
摘要:目的 探讨泌尿生殖道采集标本浓度不同对支原体液体培养法检测结果及药敏效果的影响。方法 对患者常规采样接种,将剩余的培养液加空白培养液至检测量后再接种,观察结果差异。结果 标本稀释后,女性支原体检出率无变化,男性变低,但与原液检测结果差异无统计学意义;药敏方面:四环素、交沙霉素、强力霉素、美满霉素、克拉霉素稀释前后敏感性相同,而左氧沙星、红霉素、氧氟沙星、罗红霉素的药物敏感性升高,有显著差异。结论 支原体检测结果差异与标本浓度有关系。
关键词:标本浓度;支原体检测
支原体是寄生在泌尿生殖道的病原体,是非淋性尿道炎的主要病因,也是发病率较高的性传播疾病。目前实验室对支原体检测,主要采集泌尿生殖道分泌物,用液体培养基培养法检测支原体中的解脲脲原体(UU)和人型支原体(MH)。由于男女采样部位的解剖位置不同,所用的采样拭子不同,采集到标本量会有差别。我们利用患者标本进行浓度稀释,比较稀释前后结果,观察支原体检测与标本浓度的关系。
1资料与方法
1.1一般资料 本院2012年1月~2014年12月皮肤性病门诊疑似生殖道非淋感染的患者,收集到116例支原体阳性结果,其中女76例,男40例,年龄22~50岁。
1.2标本采集 由医生采集。女性患者宫颈分泌物:先擦去宫颈口多余的粘液,再用女性拭子在宫颈管内1~2cm处取宫颈分泌物,拭子在宫颈内旋转并至少停留20s,立即床边接种培养液,然后送检。对男性患者嘱其在试验前1h内不要排尿,用男性拭子探入尿道口2~3cm ,适当旋转至少停留20s,拭子取出后床边接种培养液即刻送检。
1.3试剂 珠海迪尔生物工程有限公司的支原体(UU/MH)分离培养药敏试剂盒(微生物检测法)。
1.4试验方法 严格按试剂说明书进行操作接种后,瓶内培养液还剩0.9ml。用一次性无菌注射器吸取新开瓶的培养液2.1ml加入混匀,培养液稀释约3倍,刚好够接种一块检测卡,于24h和48h后分别观察结果。
1.5观察指标 观察稀释前后支原体检出率和药敏的差异。
1.6数据处理 实验数据采用SPSS11.5 软件进行分析,计数资料的对比用?字2检验,以P0.05显示差异有统计学意义。
2结果
2.1原接种液与稀释后培养液的支原体检出率比较 女性无变化,男性UU阳性有4例不符,其中2例为UU浓度104,UU+MH阳性结果有1例MH浓度104,差异无统计学意义,见表1。
2.2两种浓度的药物敏感试验结果对比 男性药敏不相同率比女性高。但是,无论男女,四环素、交沙霉素、强力霉素、美满霉素、克拉霉素稀释前后敏感相同。左氧沙星、红霉素、氧氟沙星、罗红霉素敏感所占的比例显著高于原液,差异有统计学意义(P0.05),见表2。
3讨论
支原体检测的液体培养基培养法是根据培养液由黄色变为红色来判断支原体的存在与药物敏感结果,对实验室要求不高,简单易行,被广大医院采用。目前,支原体检测主要采集泌尿生殖道分泌物标本,由于男女采集的部位与所用的拭子不同,且标本来源隐避和不可重复,不象血清一样稳定可以相互比较结果。本文用患者剩余标本稀释到检测量后再接种,观察到支原体浓度影响检测结果。如表1显示,男性的支原体检出率有变化,其主要原因是男性采样拭子小,粘取的样品量比女性少,稀释后标本浓度更少,代谢产物浓度不够,指示剂不显色或显色不明显[1]。
药物敏感试验方面,如表2显示:四环素、交沙霉素、强力霉素、美满霉素、克拉霉素稀释前后结果相同,而且敏感度高。左氧沙星、红霉素、氧氟沙星、罗红霉素受浓度影响大,稀释后部分由耐药变成中敏或者由中敏变成敏感,敏感性变高,药敏结果有显著差异,这是因为不同的抗菌药物对支原体最小抑菌浓度MIC不同[2]。
本文采用原接种液与稀释后培养液比较,观察到标本浓度对支原体检测结果影响小,无统计学差异;部分药敏结果有显著差异。由于两性生殖道不同,女性宫颈口神经末梢较少,几乎没有痛觉,可以标准化采集样本。男性使用的拭子比女性小几倍,粘取支原体数量比女性少,另外,其尿道对痛觉敏感,拭子还没进到位,部分人感到痛苦难忍,不能按标准程序采集到足够的标本,导致女性患者支原体感染阳性率和耐药率比男患者高[3-5],性伴之间比较也是如此[6],容易误导临床诊疗,应引起高度重视。
参考文献:
[1]甘超,占满桂.泌尿生殖道支原体培养存在问题及对策[J].吉林医学,2012,33(27):5945.
[2]马寒,陆春,朱国兴,等.解脲脲原体124株对抗菌药物最小抑菌浓度测定[J].中国皮肤性病学杂志,2008,22(3):162-163.
[3]夏晴晴,王芳,贺娟.男女泌尿生殖道支原体属感染
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