玉米幼苗根、茎、叶总蛋白质双向电泳方法的优化.pdfVIP

2012年 2^5卷6期 西 南 农 业 学 报 z25 No．6 SouthwestChinaJournalofAgricuhuralSciences 2o33 文章编号：1001—4829(2012)06—2033—04 玉米幼苗根、茎、叶总蛋白质双向电泳方法的优化 苏 源 ，余 萍 ，孔垂恩 ，蔡翌阳 ，杨 静 ，刘 林 ，李成云 ‘ (1．昆明学院生命科学与技术系，云南 昆明 650214；2．农业生物多样性与病虫害控制教育部重点实验室，云南 昆明 650201； 3．云南省农业科学院教育培训处，云南 昆明 650205) 摘 要：利用改进的三氯乙酸／丙酮法对 5叶期玉米根、茎、叶的总蛋白质进行双向电泳获得了高分辨率的电泳图谱。在等电点4 — 7范围内，根、茎、叶电泳图谱上的蛋白质点数分别为 11004-89、1275：1：72和 1327~98个。3个器官蛋白质点的分布在分子量25 - 75kD和等电点5—6的范围内相对集中。通过优化样品的清洗程序结合对蛋白质在丙酮水化液中的2次沉淀能够较好地除去 样品中的杂质而保证电泳质量。优化后的方法可用于玉米幼苗的根、茎、叶总蛋白质双向电泳的试验研究。 关键词：玉米；蛋白质组；双向电泳 中图分类号：S513 文献标识码：A OptimizationofTwo-DimensionalElectr0ph0resisforTotalProteins inMaizeSeedlingRootsandStemsLeaves SUYuan--，YU Ping ，KONGChui．si一，CAIYi-yang ，YANGJing ，LIULin。，LICheng-yun ‘ (1．LifoScienceandTechnologyDepartmentofKunmingUniversity，YunnanKunming650214，China；2．KeyLaboratoryofAgro-Biodiver- sityandPestManagementofEducationMinistryofChina，YunnanKunming650201，China；3．EducationandTrainingDepartmentofYun· nanAcademyofAgriculturalSciences，YunnanKunming650205，China) Abstract：Thehighresolution2-DEmapsoftotalproteinsfrom roots，stemsandleavesinmaizewereobtainedthroughimprovedTCA／aee— lonemethod．1100+89，1275+72and1327+98spotsweredetectedonthe2-DEmaps(pl4-7) roots，stemsandleavesinmaiez他- spectively．Thedistribution0fproteinspotson2-DEmapswasintensivelylocatedintherangeofmolecularweihgt(MW)25-75kDandpI 5-6．Theimpuritiesofproteinsamplescouldberemovedeffectivelyafterthesamplecleaningprocedureswereoptimizde andaqueousacetone W88usde forthesceondaryprecipitation．Th isstudyprovidedamoreconvenientandapplicablemethodformaiez protoemienaalysisusing2- DE． Keywords：Maize；Proteomics；Two-dimensionaldectrophoreais 双向电泳 (Two—dimensionalelectrophoresis，2一 留蛋 白质。前人已对玉米根、茎和叶双向电泳的方 DE)能够在一块凝胶上显示成百至数千个蛋 白质 法进