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P77~78习题参考答案 20 P121习题解答 10：P155作业订正 补充1：指出用电泳技术分离下列物质，pH是多少最适合，并说明理由？（6分）。 ① 血清清蛋白（pI=4.9）和血红蛋白（pI=6.8） ② 肌红蛋白（pI=4.6）和胰凝乳蛋白酶（pI=9.5） ③ 卵清蛋白（pI=4.6）和脲酶（pI=5.0）。 解：电泳分离技术中，被分离质点所带净电荷差异越大，分离效 果就越好，所以应取两者的pI的中间值，带正电的向负极移动， 带负电的向正极移动。因此， ① 最佳pH=5.8；② 最佳pH=8.2；③ 最佳pH=4.9。 P194习题解答： 2 补充1：某肽经BrCN水解得到三个肽段，这三个肽段的结构分别为Asn.Trp.Gly.Met，Gly.Ala.Leu，Ala.Arg.Tyr.Asn.Met；用胰凝乳蛋白酶水解也得到三个肽段，其中一个为四肽，用6mol/LHCl水解此四肽只得到（Asp）2和一个Met三个氨基酸，请推导出此肽的氨基酸序列。 解： P249习题解答 5：pH7.0时：② polyIle ③ polyArg ⑥ polyThr ⑦ polyPro ：不能形成α-螺旋 ∵②侧链的空间位阻大；③侧链带相同电荷；⑥侧链有OH；⑦亚氨基酸 ① polyLeu:能形成α-螺旋 ④ polyArg（ pH13））：能形成α-螺旋（侧链解离，不带电荷） ⑤ polyGlu（ pH1.5）：能形成α-螺旋（侧链不解离，不带电荷） P348习题解答： 12 补充1：某酶制剂的比活力为42U/mg酶蛋白，每毫升含12mg蛋白质，试计算当底物浓度达到饱和时，1mL反应液中含： ① 20μL酶制剂时的反应初速度；② 5μL酶制剂时的反应初速度（单位为国际活力单位）；③ 该酶制剂在使用前是否需要稀释？ 解：由题意知：每mL酶制剂含有42×12=504U ① 20μL酶制剂含有20×10-3×504=10.08U 酶促反应的初速度为10.08μmol/mL.min ② 5μL酶制剂含有5×10-3×504=2.52U， 酶促反应的初速度为2.52μmol/mL.min ③ 一般情况下，酶制剂都应当稀释，以便在适当的实验期间内底物不被过分消耗，如：10分钟内，1mL反应液内含5μL酶制剂，消耗的底物为： （2.52μmol/mL.min）×10min=2.52×10-2mol/L。因此，为了保证底物的消耗低于5%，必须使[S]＞0.5 mol/L。如此大的底物浓度是很难达到的，所以酶制剂在使用时应当稀释。 补充2：己糖激酶催化葡萄糖磷酸化时，Km=0.15mmol/L，催化果糖磷酸化时，Km=1.5mmol/L。假如两种反应的Vmax相同： ① 写出己糖酶催化葡萄糖和果糖磷酸化的反应式； ② 分别计算葡萄糖和果糖为底物时，[S]=0.15、1.5、15mmol/L时，酶催化反应的V0是多少？ 解： ① ② 根据米氏方程，计算结果如下： [S]，mmol/L 0.15 1.5 15 葡萄糖，V0 0.5Vmax 0.91Vmax 0.99Vmax 果糖， V0 0.091Vmax 0.5Vmax 0.91Vmax 补充3：乳酸脱氢酶（LDH）催化下列反应，已知NAD+在340nm处无光吸收，而NADH在340nm处有光吸收，请设计测定LDH活性的实验方法。 解：由于NAD+在340nm处无吸收，而NADH在340nm处有吸收，因此根据一定时间内NADH的生成量（测A340的大小）的多少既知LDH活力的大小。 LDH的活力单位定义为：在最适条件下，每分钟在340nm下的光吸收增加0.1个单位定为1个活力单位。 13：设：1U=1μgTyr/min 14：1U=1g淀粉/h P381习题解答 3 10：由图可知: ① Km=5×10-4mol/L ② Vmax=6μmol/L.min ③ Vmax=kcat.[ET]， kcat=Vmax/ [ET]=6/10-3=6×103/min kcat/Km=6×103/5×10-4×60 =2×105L/mol ④ kcat=6×103/min=6×103/60=100/S 13：已知：[I]=2×10-4mol/L，Km=Km`，Vmax`=75%Vmax， 又知：V=Vmax[S]/（Km+[S]）（1+[I]/Ki） Vmax`=Vmax/（1+[I]