超声波―微波协同提取何首乌多糖的工艺研究.docVIP

超声波―微波协同提取何首乌多糖的工艺研究 　　摘要：研究了超声波-微波协同提取何首乌[Fallopia multiflora（Thunb.） Harald.]多糖的最佳工艺条件，以何首乌多糖提取率为综合指标，考察料液比、提取次数、超声时间、微波时间4个因素对提取效果的影响，在此基础上，利用中心组合试验设计对提取工艺进行优化，最佳工艺条件为料液比1∶21（g∶mL），超声时间15 min，微波时间3 min，提取1次，在此条件下多糖实际提取率可达19.74%。 　　关键词：何首乌[Fallopia multiflora（Thunb.） Harald.]；多糖；微波；超声波；提取 　　中图分类号：R284.2 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2016）11-2867-05 　　DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.11.039 　　何首乌[Fallopia multiflora （Thunb.） Harald.]既是中国名贵中药材，又是食疗保健佳品[1]。按其炮制方法不同分为生首乌和制首乌。生首乌味苦、涩，性平，具有解毒、消痈、润肠通便的功效；制首乌苦、甘、涩，性温，具有补肝肾、益精血、乌须发等功效[2]。多糖广泛存在于植物、微生物和海藻中。近年来，对制何首乌多糖的生物活性的评价研究表明，制何首乌多糖具有免疫调节、抗氧化、抗衰老、降血脂及抗老年痴呆症等功效[3-5]，开展对何首乌多糖提取工艺的研究对中国何首乌资源的综合利用、产品的商业化生产等具有重要意义。 　　超声波-微波协同提取法充分利用超声波振动的空化作用以及微波的高能作用，使何首乌样品各点受到的作用一致，降低目标物多糖与样品基体的结合力，加速多糖从固相进入溶剂的过程[6-8]。本试验根据Box-Benhnken中心组合试验设计原理，采用响应面分析法对制何首乌多糖的超声波-微波协同提取工艺进行优化，为制何首乌资源的深度开发提供理论依据。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料与仪器 　　何首乌，购于聊城市药店；葡萄糖（AR），浓硫酸（AR），苯酚（AR），无水乙醇（AR）。 　　QE-200型高速中药粉碎机，武义县屹立工具有限公司；赛多利斯万分之一电子天平，北京联合科仪科技有限公司；KQ3200型超声波清洗器，昆山市超声仪器有限公司；常压微波合成/萃取仪，新仪微波化学科技有限公司；SB-2000型水浴锅，上海爱朗仪器有限公司；UV-1800型紫外分光光度计，上海美谱达仪器有限公司。 　　1.2 方法 　　1.2.1 何首乌多糖提取工艺流程 何首乌→粉碎过筛（20目）→80%乙醇溶液预处理（料液比1∶6，g∶mL，70 ℃恒温水浴，搅拌1 h）→抽滤→通风干燥→何首乌粉末→加入一定量的去离子水→超声波处理→微波处理→抽滤→滤液定容→测定吸光度。 　　1.2.2 标准曲线的绘制 精密称取105 ℃下干燥至恒重的葡萄糖25.1 mg，置于250 mL容量瓶中，加水溶解并定容至刻度，得到质量浓度为0.100 4 mg/mL的葡萄糖标准溶液。准确吸取上述葡萄糖标准溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8 mL分别置于10 mL容量瓶中，加入去离子水补至1.0 mL，各加5%苯酚溶液1.0 mL，摇匀，然后迅速加入浓硫酸5.0 mL，充分摇匀后，室温下放置20 min。以去离子水为空白，在490 nm波长处测定吸光度。以吸光度为纵坐标，以葡萄糖标准溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线，得到葡萄糖浓度（C，mg/mL）与吸光度（A）的线性回归方程C=0.098 5A-0.012 7（R2=0.999 1），其中A与浓度C之间在0～0.08 mg/mL范围内呈良好的线性关系。 　　1.2.3 何首乌多糖提取率的测定 何首乌多糖提取率采用以下公式计算： 　　何首乌多糖提取率=CV/M×100% 　　式中，C为提取液中多糖浓度；V为提取液的最终体积；M为何首乌样品的质量。 　　1.2.4 单因素试验 分别考察料液比、提取次数、超声时间和微波时间对何首乌多糖提取率的影响。①称取3.0 g何首乌粉末，固定超声时间15 min，微波时间3 min，按不同料液比1∶10、1∶15、1∶18、1∶20、1∶25（g∶mL，下同）加入去离子水，提取1次，测定提取液中多糖含量；②称取3.0 g何首乌粉末，固定料液比1∶10，微波时间3 min，超声时间分别为5、10、15、20、25 min，提取1次，测定提取液中多糖含量；③称取3.0 g何首乌粉末，固定料液比1∶10，超声时间15 min，微波时间分别为1.5、2.0、2.5、3.0、3.5 min，提取1次，测定提取液中多糖含量；④称取3.0