宽叶独行菜不同极性部位对鼠胃肠动力及MTL和GAS的影响.docVIP

宽叶独行菜不同极性部位对鼠胃肠动力及MTL和GAS的影响 　　摘要：为明确宽叶独行菜（Lepidium latifolium L.）提取物中促胃肠动力的有效部位，在小鼠腹腔注射硫酸阿托品的方法制造胃肠动力障碍模型，测定胃内色素残留率和小肠推进比，并检测血浆胃动素（MTL）和血浆胃泌素（GAS）的含量。结果表明，正丁醇部位对小鼠胃内色素残留率的影响与模型对照组比较有显著差异，水提取部位、乙酸乙酯部位有极显著差异；水提取部位对小肠推进比的影响与模型对照组比较有显著差异，乙酸乙酯部位有极显著差异；水提取部位、正丁醇部位对小鼠MTL含量影响与模型对照组比较有显著差异，乙酸乙酯部位有极显著差异，乙酸乙酯部位对小鼠GAS含量的影响与模型对照组比较有显著差异。初步判断乙酸乙酯部位为宽叶独行菜促胃肠动力的有效部位，其作用机制还有待进一步研究。 　　关键词：宽叶独行菜（Lepidium latifolium L.）；极性部位；胃肠动力；血浆胃动素（MTL）；血浆胃泌素（GAS） 　　中图分类号：S567.23+9；R915 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2016）18-4790-03 　　DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.18.039 　　宽叶独行菜（Lepidium latifolium L.）属十字花科多年生草本植物，又称大辣辣、止痢草，在中国主要产于内蒙古、西藏、青海等地，世界各地均有分布，生在村旁、田边、山坡及盐化草甸，海拔1 800～ 4 250 m；全草入药，有清热燥湿作用，治菌痢、肠炎[1]。试验用宽叶独行菜不同极性部位提取物比较其对小鼠胃排空、肠推进的作用，并观察其对血浆胃动素、胃泌素的影响，旨在为宽叶独行菜进一步的研究与开发提供理论依据。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　昆明种小鼠70只，体重（20±2） g，雌雄兼用，试验动物生产许可证号为SC×K（青）2005-0001，由青海省地方病预防控制所动物中心提供；宽叶独行菜采自青海省格尔木市大格勒乡。 　　药品和试剂：蓝色葡聚糖2000（西宁宝信生物科技有限公司）；多潘立酮片（吗丁啉）（西安杨森制药有限公司生产，批次：H109100003）；肝素钠（山东东营爱博生物制品有限公司生产，批号；大鼠胃动素（MTL）ELISA检测试剂盒（96 T）、大鼠胃泌素（GAS）ELISA检测试剂盒（96 T）（上海雅浦生物科技有限公司）。 　　仪器：RE-52B型旋转蒸发器，上海亚荣生化仪器厂；高速离心机，上海医分仪器制造有限公司；752型紫外可见分光光度计，上海菁华科技仪器有限公司；YP15KN型电子天平，上海精密科学有限公司；离心沉淀机，上海医分仪器制造有限公司；酶标仪Xmark Microplate Spectrophotometer，上海研域实验室设备有限公司；HW-1000超级恒温水浴锅，成都泰盟软件有限公司；高精度微量加样器（0.5～10 μL、2～20 μL、20～200 μL），大龙医疗设备有限公司。 　　1.2 方法 　　1.2.1 宽叶独行菜不同极性部位的制备 将宽叶独行菜全草阴干并粉碎后，用水提取2次（料液比1∶12，80 ℃，1 h），合并提取液，减压浓缩后得到黑褐色黏稠的浸膏，此为水提取部位。取水提取部位浸膏溶于适量纯水中，分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇各萃取2次，合并同一部位滤液，减压浓缩，得到浸膏分别为石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位。 　　由于宽叶独行菜的半数致死量为LD50=500 g/kg[2]，且通过预试验的结果得出1/20LD50即给予20 g小鼠0.5 g/d生药为最佳给药剂量，故将所得各部位浸膏配制成1 mL含1.67 g生药材的溶液，放置4 ℃冰箱保存备用。 　　1.2.2 动物分组与给药 将70只小鼠随机分为7组，每组10只，雌雄各半，分别为空白对照组（生理盐水）、模型对照组（阿托品）、阳性对照组（阿托品+吗丁啉）、受试药物组Ⅰ（阿托品+水提取部位）、受试药物组Ⅱ（阿托品+石油醚部位）、受试药物组Ⅲ（阿托品+乙酸乙酯部位）、受试药物组Ⅳ（阿托品+正丁醇部位）。 　　小鼠适应性喂养7 d后称重并开始灌胃给药，由试验动物与人的体表面积比等效剂量换算表[3]进行换算，阳性对照组给吗丁啉混悬液（0.8 mg/mL），受试药物组Ⅰ给水提取部位溶液（283 mg/mL），受试药物组Ⅱ给石油醚部位溶液（7 mg/mL），受试药物组Ⅲ给乙酸乙酯部位溶液（4.3 mg/mL），受试药物组Ⅳ给正丁醇部位溶液（5 mg/mL），空白组和模型组给生理盐水，均按0.3 mL/20 g灌胃，灌胃前将各部位药物水浴加热至37 ℃并混匀，每天灌胃1