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TRAIL 诱导细胞死亡及其耐药机制研究进度 　　1 TRAIL 及其受体 1.1 TRAIL/Apo-2LTRAIL/Apo-2L 是一个 33 ~ 35 kD 的 II 型跨膜蛋白，由 281 个氨基酸残基组成，胞外羧基端所具有的高度保守TNF 同源结构域(TNF homology domain，THD)与三聚体的形成有关。在生理条件下，TRAIL/Apo-2L 分子以完整的膜结合形式存在于免疫效应细胞(如 T 细胞)的细胞膜上或者以截断的可溶性形式(残基 114 ~ 281)被尿激酶纤溶酶激活物(uridylyl phosphate adenosine，uPA)释放。这两种形式均具有生物活性，都能与死亡受体形成三聚体，并由锌离子稳定，产生凋亡诱导作用。 　　1.2 TRAIL 受体TRAIL 受体属于 TNF 受体超家族，分为三种： 　　⑴死亡受体(death receptor)：包括 TRAIL-R1/DR4 和TRAIL-R2/DR5，分别是由 468 个和 411 个氨基酸残基组成的 I 型跨膜蛋白，有 58% 的一致性，在机体内分布广泛。两者的胞外区均有 2 个富含半胱氨酸的假重复序列，胞内区有与 TNFR、Fas 同源的死亡结构域(death domain，DD)。 　　⑵诱骗受体(decoy receptor)：包括 TRAIL-R3/DcR1 和TRAIL-R4/DcR2。DcR1 是由 299 个氨基酸残基组成的I 型跨膜蛋白，其胞外区与 DR4、DR5 类似，存在 2 个富含半胱氨酸的序列，没有跨膜区和胞内区，仅通过一个糖酯磷脂酰肌醇(glycosyl phosphatidyl inositol，GPI)连接在细胞表面。因此，它与 TRAIL 结合后不能诱导凋亡。DcR2是由 386 个氨基酸残基组成的 I 型跨膜蛋白，存在跨膜区和一段被剪切的 DD，也无法传递凋亡信号。 　　⑶骨保护素(osteoprotegerin，OPG)：TRAIL 的第 3 个诱骗受体，由 401 个氨基酸残基组成的胞外区可溶性受体，与 TRAIL 有较弱的结合能力，能够抑制 TRAIL 所诱导的凋亡。 　　2 TRAIL 诱导细胞死亡的机制 　　2.1 TRAIL 诱导细胞凋亡TRAIL 与功能性受体 DR4/DR5 结合后，活化形成三聚体，通过 DD 相互作用，募集死亡结构域连接蛋白(Fasassociated death domain，FADD)到受体上，再通过 FADD中的死亡效应结构域(death effector domain，DED)募集启始 caspases(pro-caspase-8/10)到受体复合物上，形成死亡诱导信号复合体(death-inducing signaling complex，DISC)。Pro-caspase-8/10 在 DISC 中自我剪切活化，形成活性caspase-8/10 并释放到细胞质中，激活下游 caspase 信号级联，诱导细胞凋亡。由于内源性 caspase 抑制剂 X 染色体连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein，XIAP)的表达极大地影响 DISC 中 caspase 的活化，因此根据 caspase活化程度及时间的不同，将细胞分为 I 型和 II 型。在 I 型细胞中，caspase-8/10 充分活化，受 XIAP 的抑制较小，能直接激活效应 caspases(caspase-3/6/7)，诱导细胞凋亡的外在途径(extrinsic pathway)。在 II 型细胞中，XIAP 的表达只允许少量活性 caspase-8/10 的形成，需要激活线粒体介导的内在凋亡途径(intrinsic pathway)：少量活性 caspase-8/10分裂 BH3-only 蛋白(BCL-2 inhibitory BH3-domain containingprotein，BID)形成 tBID(truncated BID)，tBID 运输到线粒体，激活 BAX(Bcl-2 associated X protein)和 BAK(Bcl-2antagonist killer 1)，进而诱导线粒体释放前凋亡因子(如细胞色素 c、SMAC/DIABLO、HTRA2/Omi)到细胞质中，细胞色素 c、凋亡蛋白活性因子-1(apoptosis activatingfactor-1，APAF-1)和 pro-caspase-9 在细胞质中组成凋亡小体，能够激活另一个启始 caspase--caspase-9，从而进一步激活效应 caspase-3/7，引起细胞凋亡。SMAC/DIA