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G 蛋白偶联的雌激素受体在雄性生殖中的作用分析 　　近年来大量研究表明，外源性雌激素( exoestrogens，EEs) 与男性泌尿生殖系统畸形关系密切，是人类隐睾、尿道下裂、精子数量减少、睾丸癌等发病率增高的重要原因。传统观点认为，雌激素主要通过经典的核受体雌激素受体alpha;( estrogen receptoralpha;，ERalpha;) 、雌激素受体beta;( estrogen receptor beta;，ERbeta;)发挥慢速的生物学效应。然而近些年来，许多研究发现雌激素能在数秒至数分钟内完成其生物学效应，并涉及到细胞的第二信使途径，这种“快速的”、“非基因”效应并非由经典的雌激素受体ERalpha;、ERbeta;所介导。G 蛋白偶联的雌激素受体( G protein-coupledestrogen receptor，GPER) 是迄今为止被发现的最重要的雌激素膜受体，EEs 可通过其反式激活表皮生长因子受体( epidermal growth factor receptor，EGFR) 等信号通路，参与介导这种快速的非基因效应，间接调节基因转录，发挥多种生物学效应。本文就GPER 在雄性生殖系统中的研究现状做一综述，为以后的研究课题提供方向和理论基础。 　　1 GPER 的分子结构及亚细胞定位 　　GPER 属于G 蛋白偶联受体家族，与经典的雌激素核受体并没有同源性，是一种新型的雌激素受体。多个不同的研究团队从人类B 细胞、脐静脉血管内皮细胞、乳腺癌MCF7 细胞克隆出该蛋白，并分别将其命名为趋化因子受体2( chemokine receptorlike2，CMKRL2)、流激内皮G 蛋白偶联受体1( flow-induced endothelial G-protein coupled receptor1，FEG-1)、G 蛋白偶联受体30( G protein-coupledreceptor 30，GPR30)。2009 年国际药理学联合会( International Union of Pharmacology，IUPHAR) 将GPR30 及其他不统一的称呼正式修订为GPER。研究发现GPER 含有7 次跨膜的高度保守区域，其基因定位于染色体7p22 上。 　　通过核酸和氨基酸序列分析后证实GPER 是一个长达2 604 bp、编码375个氨基酸、相对分子质量约42 270的蛋白质，包括一个长1 128 bp 的开放性阅读框架( open readingframe，ORF) 。GPER 广泛分布于人体的正常组织，如中枢神经系统( 皮质、小脑、海马等) 、心脏、肺、肝脏、骨骼肌以及泌尿生殖系统等，同时在某些恶性肿瘤中也高度表达，如甲状腺癌、乳腺癌、子宫内膜癌、卵巢癌、前列腺癌等。GPER 的亚细胞定位对于其功能研究具有重要的作用，但目前还存在争议。以往的观点认为GPER 配体结合位点均存在于细胞膜表面，但越来越多的实验研究证实GPER 在胞质中亦有表达。张镟等的研究也发现，GPER主要表达于小鼠睾丸引带细胞的细胞膜和细胞质，免疫电镜显示GPER 主要定位于粗面内质网。GPER 的亚细胞定位还需进一步的深入研究。 　　2 GPER 在雄性生殖系统的分布 　　GPER 在雄性生殖系统中的表达比较复杂，已发现存在于生殖细胞(精原细胞、精母细胞和精子细胞) 、支持细胞、间质细胞、附睾、睾丸引带细胞等，甚至还高表达于生殖系统肿瘤，如精原细胞瘤、胚胎源性肿瘤以及睾丸间质细胞瘤等。 　　2. 1 睾丸GPER 在雄性动物睾丸的分布存在差别，在所研究物种的睾丸中都可以证实GPER 的表达。Royer 等的研究发现GPER 存在于大鼠睾丸的支持细胞中，将17beta;-雌二醇(17beta;-estradiol，17beta;-E2) 作用于其后发现GPER 控制着睾丸支持细胞增殖和凋亡的生理过程。Sandner 等发现在猕猴胚胎期，生精小管血管平滑肌细胞未能见到GPER 的表达，利用Western 印迹及RT-PCR 技术证实在猕猴新生儿期(出生后约5 ～ 6 d) 到婴幼儿期间(约1 岁左右) ，GPER 偶可表达于生精小管血管平滑肌细胞及睾丸间质细胞，直至青春期前(约2 ～3 岁) ，生精小管血管平滑肌细胞和睾丸间质细胞上GPER 合成量大大增加。Oliveira 等利用RT-PCR技术追踪到人类生精小管上GPER mRNA 的存在，并用免疫组化、Western 印迹检测到GPER 在生精小管上的表达，证实GPER 仅表达于二倍体的生精细胞，未能在单倍体的生精细胞中检测到其存在。Fietz等利用原位杂交和免疫组化技术证实GPER高表达于人类睾丸Leyd