乾燥兔化猪瘟疫苗有效期限之探讨.docVIP

保存時間對乾燥兔化豬瘟疫苗 謝政橘＊、江　翰、曾俊憲、黃金城 行政院農業委員會家畜衛生試驗所 摘要　有鑑豬瘟對畜牧產業的影響，本所過去已開發出兔化豬瘟疫苗，於各豬場注射免疫後均具不錯成效故由品管保存庫中隨機選出三批過期半年至一年半之疫苗，輔以動物實驗 關鍵詞：乾燥兔化豬瘟疫苗，有效期限，效力 緒言 豬瘟係由豬瘟病毒引起之高度傳染之急性敗血症，主要特徵為全身性出血，感染率與死亡率均高達95%。一般多為急性型，感染保育豬（8 - 12週）為最普通。感染豬隻有精神不振、厭食、倦伏、姿勢歪斜、喜躺下、經常堆擠在一起，皮毛粗糙。在症狀出現前有高熱（40.5 - 42.5），早期便秘後下痢，末期在腹部皮膚有彌漫性充血及紫斑，在耳根、尾部及四肢特別顯著，神經症狀如肌肉發抖，抽搐及後肢麻痺亦為常見，病發後7至15天死亡。懷孕母豬感染會有木乃伊化，死產或流產的現象。然世界動物衛生組織（OIE）將豬瘟歸類於會影響國際畜產品貿易及造成國家整體社會、經濟重大影響之甲類動物傳染病。因此各國皆將豬瘟的防疫工作列為國家動物防疫的重點工作，採取必要的預防、防疫和檢疫措施，以提升畜牧產業之收益。世界主要豬肉生產及輸出國如美國、加拿大及歐盟各國如英國、丹麥等，皆曾以全場撲殺之政策，成功地撲滅豬瘟成為非疫國。除可降低毛豬生產成本，提升外銷競爭力，也因無豬瘟而符合更多輸入國之動物檢疫要求，另一方面，亦可依國際動物檢疫慣例，以國際許可的檢疫規範，對豬瘟疫區國家採取限制豬肉及其他動物產品進口措施，以保護國內產業。有鑑於豬瘟對臺灣畜牧產業的影響，本所過去已開發出乾燥兔化豬瘟疫苗並於各豬場注射免疫後，均具不錯成效。我國四十多年來實施乾燥兔化豬瘟疫苗免疫結果，雖使豬瘟發生率大為降低，但仍無法有效田間的豬瘟病毒。令人聯想到現行使用的乾燥兔化豬瘟疫苗其實質的效期內是否真正具有保護效力，故本次實驗是為配合動植物防疫檢疫局對動物藥品之抽檢，檢測疫苗在有效期間內，是否仍保有合於標準之病毒力價，故此次由品管保存庫中隨機選出批過期半年至一年半之疫苗，以相關實驗證明其病毒含有量作為其效力依據之評估。材料方法 本實驗由本所選體至公斤兔出血熱抗體陰性健康兔，進行實驗室試驗檢測樣本 本實驗由本所製劑研究組品管冷藏保存庫中隨機選出批過期半年至一年半之乾燥兔化豬瘟疫苗，分別為批號2613（過期一年半）、批號2639（過期一年）及批號2665（過期半年），評估病毒力價及產品自身是否變質，進行實驗室試驗。 檢測項目依據《動物用藥品檢驗標準》之乾燥兔化豬瘟疫苗檢驗標準相關規範，分別進行分析試驗項目如下特性試驗 無菌試驗 真空試驗 於暗室距離5公釐以內以Teslar Coil行無極放電時，瓶內須有放電反應含濕度試驗 病毒含量試驗 取出疫苗1劑量（2 ）作10-1-10-4階段稀釋，將10-2-10-4每一階段各靜脈注射4隻，每日上、下午各量體溫1次，呈現兔化豬瘟病毒對兔之特殊熱反應（雙峰性40.5℃以上高溫）者認定有兔化豬瘟病毒之感染，7天後求出每劑量之50%感染量（RID50）假性狂犬病病毒迷入否定試驗 乾燥兔化豬瘟疫苗20劑量以稀釋液40 mL稀釋後，接種於2隻，每隻皮下各接種5劑量（10 mL），接種後觀察14天，接種部位不得發生假性狂犬病之皮膚搔癢症狀或反應死亡認定試驗 每隻靜脈注射1劑量（2 ml），接種3隻，每日上、下午各量體溫1次，觀察14天後是否呈特殊熱反應（雙峰性40.5℃以上高溫）。對照組1隻靜脈注射稀釋液1劑量，另2隻則取已稀釋的疫苗2劑量與等量1,000倍以上豬瘟免疫血清混合後，置於37℃暖房1小時震盪後，靜脈注射2隻，每隻1劑量，每日上、下午各量體溫1次，觀察14天，須無熱反應結果 特性試驗 經檢測後，所有檢測樣本外觀均為粉紅色塊狀，且無異物及異常氣味。經後受檢樣本均為濃度均一之粉紅色懸浮液無菌試驗 觀察期間及培養，檢視樣品組微生物生長真空試驗 每一檢體均於暗室距離5公釐以內以Teslar Coil行無極放電，瓶內均有放電且有藍色光線呈現 含濕度試驗 病毒含量試驗 批號2613（過期一年半）、批號2639（過期一年）及批號2665（過期半年）進行之實驗結果，其中批號2639及批號2665此二批次之檢體，均有呈現兔化豬瘟病毒對之特殊熱反應（雙峰性40.5℃以上高溫）（圖1）判定為兔化豬瘟病毒之感染，而批號2613則否（圖2）假性狂犬病病毒迷入否定試驗 所有檢體在觀察14天，接種部位均無假性狂犬病之皮膚搔癢症狀及死亡反應認定試驗 未與抗血清中和之檢體在本試驗方面均有呈現特殊熱反應（雙峰性40.5℃以上高溫）。與抗血清中和之對照試驗方面，三者在14日的觀察期間均無熱反應討論 ℃環境在本次實驗室試驗，先就過期之乾燥兔化豬瘟疫苗進行其特性試驗、真空試驗、含濕度試驗