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非溶剂法生产低咖啡碱儿茶素样品检测
非溶剂法生产低咖啡碱儿茶素 生产工艺: 1、绿茶提取液准备：取3kg茶叶以1:10比例提取，提取两次，温度80℃，初滤后得到滤液50L。 2、陶瓷膜过滤：将初滤液用孔径为200nm的陶瓷膜精滤，得到精滤液40L。 3、上样液的调配：将精滤液按比例调配成pH=4，酒精度为10%的绿茶溶液，为上样液。 4、柱平衡及上样洗脱： 柱平衡：用10%酒精，柠檬酸调pH=4平衡树脂柱，使整个树脂柱体系处于酒精度为10%， pH=4。 上样量为40L(床层体积为47L)，上样：以V=1.5L/min流速上样，上样完成后静置10min。 10%洗脱：以5BV体积的10%酒精pH=4洗脱，流速控制在1.6L/min≤V ≤1.8L/min。 40%洗脱：以3BV体积的40%酒精洗脱，流速控制在1.7L/min≤V ≤1.9L/min。 70%洗脱：以2BV体积的70%酒精洗脱，流速控制在1.7L/min≤V ≤1.9L/min。 5、浓缩及干燥 由于膜浓缩设备有限，所以同时用纳滤膜设备及加热设备一起浓缩。 检测工艺 1、检测条件 1）流动相配制： A相：0.5%冰醋酸+3%乙腈+水定容 B相：0.5%冰醋酸+30%乙腈+水定容 2）液相梯度洗脱条件： v=1mL/min 波长280nm Time=0 B=0 Time=45 B=100 Time=50 B=100 Time=50.01 B=0 Time=60 B=0 Time=0 Stop 进样量20ul 柱温30℃ 3)检测仪器：戴安PH680高效液相色谱仪，色谱柱：C18柱(250mm*4.6mm,5um) 2、标准曲线方程 EGCg 浓度 峰面积 0 0 0.5 185.938 1 376.523 1.5 531.483 2 714.3 2.5 856.011 咖啡因 浓度 峰面积 0 0 0.5 192.747 1 371.133 1.5 501.032 2 650.444 咖啡因的计算是按比例进行。 EGCg：45.63%＞40% ｝0～45 min 之间，Time=0时A相为100%随后逐渐减少至B相为100% ｝100%B相稳定5 min ｝100%A相稳定10 min
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