醛酮类化合物检测方法.doc

醛酮類化合物检测方法─高效能液相层析法中华民国89年8月29日（89）环署检字第48966号公告自中华民国89年11月29日起实施NIEA R502.10C中华民国91年3月5日 环署检字第0910014627号公告修正为NIEA R502.11C一、方法概要本方法用以检测非气体基质中具游離醛酮基 (free carbonyl) 化合物。固态样品萃取液或水样经过濾后，在 40 ℃ 下与 2,4-二硝基苯胼 (2,4-dinitrophenylhydrazine, DNPH) 反应，生成相对应之 DNPH 衍生物，经 C18 管柱萃取或二氯甲烷液相－液相萃取及浓缩后，取适当体积注入高效液相层析仪 (HPLC) 。使用逆相层析管柱及梯度冲提分離出各种醛類与酮類之 DNPH 衍生物，用紫外光侦测器在 360 nm 之波长测其吸收强度，进行目标待测物的确认与定量。二、适用范围（一）本方法适用于水样、土壤、废弃物、及毒性化学物质样品检测。各目标待测物列出如下：（二）方法侦测极限列在表一及表二。视样品基质干扰情形及步骤中所使用的样品体积，各样品的方法侦测极限，可能与表中所列之值不同。三、干扰（一）方法的干扰可能源自于溶剂、试剂、玻璃器皿和样品处理用设备的污染，导致随机干扰，或使层析图谱的基线升高，因此必须使用相同的检测条件设定，依七、（四）节步骤执行实验室内试剂及器皿之方法空白检测，以确定无干扰物存在。待测物 CAS No.a甲醛(Formaldehyde) 50-00-0乙醛(Acetaldehyde) 75-07-0丙醛(Propanal, Propionaldehyde) 123-38-6巴豆醛(Crotonaldehyde) 123-73-9丁醛(Butanal, Butyraldehyde) 123-72-8环己酮(Cyclohexanone) 108-94-1戊醛(Pentanal, Valeraldehyde) 110-62-3己醛(Hexanal, Hexaldehyde) 66-25-1庚醛(Heptanal) 111-71-7辛醛(Octanal) 124-13-0壬醛(Nonanal) 124-19-6癸醛(Decanal) 112-31-2注：a 化学文摘社登记号码。醛酮類化合物检测方法─高效能液相层析法(NIEA R502.11C) 第 1 页，共 20 页.tw/niea/REFUSE/R50211C.htm 2008/10/61.玻璃器皿必须绝对洁净，使用后必须立即以最后所使用的溶剂冲洗，接着用清洁剂和热水清洗，再用自來水和不含有机物的试剂水清洗，清洗完成后，晾干并干燥之，使用前再于 130 ℃ 烘箱中烘 2-3 小时。乙腈的冲洗步骤可以烘箱烘烤步骤取代，不可用甲醇或丙酮清洗玻璃器皿，因这些溶剂会与 DNPH 反应而生成干扰物。于干燥并冷却后，玻璃器皿应保存于一洁净区域，避免灰尘堆积或其它污染物的污染。2.使用高纯度试剂和溶剂可减少干扰，并可使用全玻璃蒸馏系统蒸馏纯化溶剂。3.当执行硅胶管处理步骤时，必须戴聚乙烯 (PE) 材质的手套，以避免可能的污染。（二）由于环境中自然存在甲醛，故常发生 DNPH 试剂被甲醛污染，所使用的DNPH试剂必须以 HPLC 级的乙腈进行多次再结晶纯化步骤，再结晶纯化步骤系于 40 - 60 ℃ 慢慢将溶剂蒸发以得到最多的结晶，纯化后的 DNPH 结晶保存于 HPLC 级的乙腈中。于执行样品检测前应先执行 DNPH 中所含醛酮類化合物不纯物的检测，不纯物的量应小于 25 mg/L。參見附錄之 DNPH 再结晶步骤。（三）基质干扰可能來自于与样品共同被萃取出來的污染物，基质干扰情形可分成样品來源和基质本身。若一系列样品都有干扰问题，则应更换移动相或进行必要的清洗步骤。（四）若样品中含有乙醇则于进行衍生步骤时，会产生乙醛，此背景问题，将无法检测浓度低于 0.5 ppm ( 500 ppb ) 的乙醛。四、设备（一）高效液相层析仪(组装式)1.泵系统：可梯度冲提，固定流量控制可达 1.5 mL/min.。2.高压注射阀，附 20 μL样品回路。3.管柱：250 mm × 4.6 mm 内径， 5 - μm 粒径之 C18 填充剂 (Zorbax）或同级品。4.吸光侦测器：360 nm。5.与侦测器聯通的记錄器：最好用數据处理系统以量测尖峰面积及滞留时间。6.氦气：供移动相溶剂除气。7.移动相盛装容器和抽气过濾装置：供盛装和过濾 HPLC 移动相之用，过濾装置必须全为玻璃和铁氟龍材质，并使用 0.22 μm 聚酯濾膜。8.样品注射针：将样品注入 HPLC